Vigtig:
Sørg for, at enhver prøve/opløsning, du måtte have tilbage i din kuvette, ikke vil reagere voldsomt med den opløsning/væske, du vil bruge til rengøring!

Brug ikke stærke baser såsom kalium eller natriumhydroxid. De kan beskadige kuvetterne.

A. Vandopløselige prøver med lav molekylvægt
1) Skyl med renset vand.
2) Skyl derefter med acetone eller ethanol.
3) Føntør med ren, tør, trykluft eller nitrogen.
4) Rengør det udvendige af kuvetten ved at tørre forsigtigt af med linserensepapir fugtet med acetone eller ethanol.

Sørg for, at du ikke opbygger tryk i kuvetten. Brug ikke husluft uden at have et filter installeret. Dette er ofte tilstrækkeligt til at rense kuvettens indre.

Du kan også bruge en kuvetteskive til dette, hvis du har en. Jeg anbefaler ikke kuvettecentrifuger til tørring.

B. Biomakromolekyler

Særligt denaturerede proteiner kan være ret klistrede, og deres fjernelse fra kvartsoverflader kræver ofte mere aggressive rengøringsmetoder. Tre metoder er angivet nedenfor. Du skal muligvis prøve mere end én af dem, før din kuvette er ren.

I. Nogle leverandører leverer deres egne mærker af kuvetterengøringsmidler, normalt opløsninger af anioniske og ikke-ioniske rengøringsmidler i pH-området 9,5 til 12.

Deres hjemmesider giver vejledning om kuvetterengøring, og deres anbefalede protokoller er gode. De er dog ikke altid nok til at fjerne protein fra kuvetteoverflader.

II. “Nano Strip” (fra Cyantek)

Bær laboratoriefrakke, beskyttelsesbriller, handsker, lukkede sko og lange bukser, alt mens du arbejder i et stinkskab! For at bruge Nano Strip følg Salpetersyre-protokollen nedenfor ved at bruge Nano Strip i stedet. Vær forsigtig, plastoverførselspipetter eller flade gelpåfyldningsspidser holder ikke til Nano Strip.

III. Salpetersyre

Bær laboratoriefrakke, beskyttelsesbriller, handsker, lukkede sko og lange bukser, alt mens du arbejder i et stinkskab!

• Efter brug tages kuvetten ud af holderen og så meget af prøven som muligt fjernes ved hjælp af en engangspipette med fin spids eller en gelpåfyldningsspids til mikrokuvetter.
• Skyl fire eller fem gange med enten buffer eller renset vand (en bufferskylning bruges til prøver med proteiner, der udfældes i renset vand). Hvis der anvendes en bufferskylning, skal den efterfølges af yderligere skylning med renset vand.
• Skyl flere gange med acetone eller ethanol, og blæs derefter grundigt med ren tør trykluft eller nitrogen.

Bemærk:
Du kan også bruge en kuvetteskive til dette, hvis du har en. Jeg anbefaler ikke kuvettecentrifuger til tørring.

Det er særligt vigtigt, at kuvetten er helt tør inden næste trin. Hvis den ikke er det, kan varme fra blanding af syre med vand eller ethanol beskadige kuvetten! Fortsæt med enten den gennemsigtige kuvette eller den sorte antireflekterende belægningskuvettetrin nedenfor.

Klare kuvetter (ingen sort belægning på ydersiden)

• Nedsænk i koncentreret salpetersyre, og sørg for, at luften i kuvetten er helt fortrængt med syren.

Advarsel:
Sørg for, at beholderen med syren er tydeligt mærket med indholdet og opbevares et sikkert sted. Sørg for, at kuvetten ikke bliver beskadiget, mens beholderen flyttes rundt.

• Lad kuvetten trække i 10 minutter til 30 minutter (eller natten over med 2 M salpetersyre, eller hvis du bruger Nano-Strip iblødgør 30 minutter).
• Over en drypbakke skal du forsigtigt fjerne kuvetten fra syren med en pincet af rustfrit stål, mens du griber kuvetten let om halsen, ikke i de optiske overflader.
• Brug en engangspipette med fin spids eller gelpåfyldningsspidser, og fjern forsigtigt så meget af syren som muligt fra kuvetten. (Igen er Nano-strip ikke kompatibel med plastpipetter)
• Skyl forsigtigt kuvetten med renset vand flere gange.
• Efter mindst 7 skylninger skal du måle et fluorescensspektrum af den vandfyldte kuvette for at bevise, at den er ren ved at bruge de parametre, du ville bruge til at måle prøven, hvorfra forureningen kom fra.
• Skyl den rene kuvette med acetone eller ethanol og tør den.
• Rengør det udvendige af kuvetten ved at tørre forsigtigt af med linserensepapir fugtet med acetone eller ethanol. Tjek at kuvetten er ren ved at holde den op mod lyset. Der bør ikke være nogen synlig forurening eller udtværinger.
• Hvis det ikke er nødvendigt med det samme, skal du opbevare kuvetten i et rent, tørt miljø.

Kuvette med sort anti-reflekterende belægning på ydersiden

Nedsænk ikke coatede kuvetter i salpetersyre. Stærke syrer (og visse opløsningsmidler) vil nedbryde belægningen.

• Fyld kuvetten med syre og sørg for ikke at dryppe noget på ydersiden ved hjælp af en overførselspipette eller pipettespids. Undgå metalsprøjtenåle eller glas, da de kan ridse kuvetten.
• Sørg for, at luften i kuvetten er helt fortrængt med syren.

Advarsel:
Sørg for, at beholderen med syren er tydeligt mærket med indholdet og opbevares et sikkert sted. Sørg for, at kuvetten ikke bliver beskadiget, mens beholderen flyttes rundt.

• Lad trække i 10 minutter til 30 minutter (eller natten over med 2 M salpetersyre), (med Nano-Strip burde 30 minutter være nok).
• Brug en engangspipette med fin spids eller gelpåfyldningsspidser, og fjern forsigtigt så meget af syren som muligt fra kuvetten. (Igen er Nano-strip ikke kompatibel med plastpipetter)
• Skyl forsigtigt kuvetten med renset vand flere gange.
• Efter mindst 7 skylninger skal du måle et fluorescensspektrum af den vandfyldte kuvette for at bevise, at den er ren ved at bruge de parametre, du ville bruge til at måle prøven, hvorfra forureningen kom fra.
• Skyl den rene kuvette med acetone eller ethanol og tør den.
• Rengør forsigtigt ydersiden af kuvetten med acetone eller ethanol ved hjælp af en blød fnugfri serviet. Tjek at kuvetten er ren ved at holde den op mod lyset. Der bør ikke være nogen synlig forurening eller udtværinger.
• Hvis det ikke er nødvendigt med det samme, skal du opbevare kuvetten i et rent, tørt miljø.

Kilde