Importante:
Assicurati che qualsiasi campione/soluzione che potresti aver lasciato nella cuvetta non reagisca violentemente con qualsiasi soluzione/liquido che utilizzerai per la pulizia!

Non utilizzare basi forti come potassio o idrossido di sodio. Possono danneggiare le cuvette.

A. Campioni solubili in acqua a basso peso molecolare
1) Sciacquare con acqua purificata.
2) Quindi risciacquare con acetone o etanolo.
3) Asciugare con aria compressa pulita, asciutta o azoto.
4) Pulire l’esterno della cuvetta strofinando delicatamente con carta per la pulizia delle lenti inumidita con acetone o etanolo.

Assicurarsi di non aumentare la pressione nella cuvetta. Non utilizzare l’aria di casa senza avere un filtro installato. Questo è spesso sufficiente per pulire l’interno della cuvetta.

Puoi anche usare un lavacuvette per questo se ne hai uno. Non consiglio le centrifughe a cuvetta per l’asciugatura.

B. Biomacromolecole

Le proteine particolarmente denaturate possono essere piuttosto appiccicose e la loro rimozione dalle superfici di quarzo richiede spesso metodi di pulizia più aggressivi. Di seguito sono elencati tre metodi. Potrebbe essere necessario provarne più di uno prima che la cuvetta sia pulita.

I. Alcuni fornitori forniscono le proprie marche di detergenti per cuvette, solitamente soluzioni di detergenti anionici e non ionici con pH compreso tra 9,5 e 12.

I loro siti Web forniscono indicazioni sulla pulizia delle cuvette e i loro protocolli consigliati sono buoni. Tuttavia, non sono sempre sufficienti per rimuovere le proteine dalle superfici delle cuvette.

II. “Nano Strip” (da Cyantek)

Indossa camice da laboratorio, occhiali, guanti, scarpe chiuse e pantaloni lunghi, il tutto mentre lavori sotto una cappa! Per utilizzare Nano Strip, seguire il protocollo dell’acido nitrico di seguito utilizzando invece Nano Strip. Fare attenzione, le pipette di trasferimento in plastica o i puntali di caricamento del gel piatti non reggono a Nano Strip.

III. Acido nitrico

Indossa camice da laboratorio, occhiali, guanti, scarpe chiuse e pantaloni lunghi, il tutto mentre lavori sotto una cappa!

• Dopo l’uso, prendere la cuvetta dal supporto e rimuovere quanto più campione possibile utilizzando una pipetta di trasferimento monouso a punta fine o una punta di caricamento del gel per microcuvette.
• Sciacquare quattro o cinque volte con tampone o acqua purificata (un risciacquo tampone viene utilizzato per campioni con proteine che precipitano in acqua purificata). Se viene utilizzato un risciacquo tampone, deve essere seguito da un ulteriore risciacquo con acqua purificata.
• Risciacquare più volte con acetone o etanolo, quindi asciugare accuratamente con aria compressa asciutta pulita o azoto.

Nota:
Puoi anche usare un lavacuvette per questo se ne hai uno. Non consiglio le centrifughe a cuvetta per l’asciugatura.

È particolarmente importante che la cuvetta sia completamente asciutta prima del passaggio successivo. In caso contrario, il calore prodotto dalla miscelazione di acido con acqua o etanolo potrebbe danneggiare la cuvetta! Continuare con la cuvetta trasparente o la cuvetta con rivestimento antiriflesso nero di seguito.

Cuvette trasparenti (nessun rivestimento nero all’esterno)

• Immergere in acido nitrico concentrato, assicurandosi che l’aria nella cuvetta sia completamente spostata dall’acido.

Attenzione:
Assicurarsi che il recipiente contenente l’acido sia chiaramente contrassegnato con il suo contenuto e sia conservato in un luogo sicuro. Assicurarsi che la cuvetta non venga danneggiata durante lo spostamento del recipiente.

• Lasciare in ammollo la cuvetta da 10 minuti a 30 minuti (o durante la notte con 2 M di acido nitrico o se si utilizza Nano-Strip ammollo per 30 minuti).
• Su una vaschetta raccogligocce, rimuovere con attenzione la cuvetta dall’acido utilizzando una pinzetta in acciaio inox, afferrando leggermente la cuvetta per il collo, non per le superfici ottiche.
• Utilizzando una pipetta di trasferimento monouso a punta fine o punte di caricamento del gel, rimuovere con attenzione quanto più acido possibile dalla cuvetta. (Ancora una volta Nano-strip non è compatibile con le pipette di plastica)
• Sciacquare accuratamente la cuvetta con acqua purificata più volte.
• Dopo almeno 7 risciacqui, misurare uno spettro di fluorescenza della cuvetta riempita d’acqua per dimostrare che è pulita utilizzando i parametri che utilizzeresti per misurare il campione da cui provengono le contaminazioni.
• Sciacquare la cuvetta pulita con acetone o etanolo e asciugarla.
• Pulire l’esterno della cuvetta strofinando delicatamente con carta per la pulizia delle lenti inumidita con acetone o etanolo. Verificare che la cuvetta sia pulita sollevandola verso la luce. Non dovrebbero esserci contaminazioni o macchie visibili.
• Se non è necessario immediatamente, conservare la cuvetta in un ambiente pulito e asciutto.

Cuvetta con rivestimento antiriflesso nero all’esterno

Non immergere le cuvette rivestite in acido nitrico. Gli acidi forti (e alcuni solventi) degraderanno il rivestimento.

• Riempire la cuvetta con acido facendo attenzione a non gocciolare sulla superficie esterna utilizzando una pipetta di trasferimento o un puntale. Evitare aghi per siringhe in metallo o vetro poiché potrebbero graffiare la cuvetta.
• Assicurarsi che l’aria nella cuvetta sia completamente spostata dall’acido.

Attenzione:
Assicurarsi che il recipiente contenente l’acido sia chiaramente contrassegnato con il suo contenuto e sia conservato in un luogo sicuro. Assicurarsi che la cuvetta non venga danneggiata durante lo spostamento del recipiente.

• Lasciare in ammollo da 10 minuti a 30 minuti (o per una notte con acido nitrico 2 M), (con Nano-Strip 30 minuti dovrebbero essere sufficienti).
• Utilizzando una pipetta di trasferimento monouso a punta fine o punte di caricamento del gel, rimuovere con attenzione quanto più acido possibile dalla cuvetta. (Ancora una volta Nano-strip non è compatibile con le pipette di plastica)
• Sciacquare accuratamente la cuvetta con acqua purificata più volte.
• Dopo almeno 7 risciacqui, misurare uno spettro di fluorescenza della cuvetta riempita d’acqua per dimostrare che è pulita utilizzando i parametri che utilizzeresti per misurare il campione da cui provengono le contaminazioni.
• Sciacquare la cuvetta pulita con acetone o etanolo e asciugarla.
• Pulire delicatamente l’esterno della cuvetta con acetone o etanolo utilizzando un panno morbido privo di lanugine. Verificare che la cuvetta sia pulita sollevandola verso la luce. Non dovrebbero esserci contaminazioni o macchie visibili.
• Se non è necessario immediatamente, conservare la cuvetta in un ambiente pulito e asciutto.

Fonte