Limpieza de cubetas de fluorescencia
Importante:
¡Asegúrese de que cualquier muestra/solución que pueda haber quedado en su cubeta no reaccione violentamente con cualquier solución/líquido que usará para la limpieza!
No utilice bases fuertes como hidróxido de potasio o sodio. Pueden dañar las cubetas.
A. Muestras solubles en agua de bajo peso molecular
1) Enjuague con agua purificada.
2) Luego, enjuague con acetona o etanol.
3) Seque con aire comprimido o nitrógeno limpio y seco.
4) Limpie el exterior de la cubeta frotando suavemente con papel de limpieza de lentes humedecido con acetona o etanol.
Asegúrese de no acumular presión en la cubeta. No use el aire de la casa sin tener un filtro instalado. Esto suele ser suficiente para limpiar el interior de la cubeta.
También puede usar una lavadora de cubetas para esto si tiene una. No recomiendo las cubetas centrífugas para el secado.
B. Biomacromoléculas
Las proteínas particularmente desnaturalizadas pueden ser bastante pegajosas y su eliminación de las superficies de cuarzo a menudo requiere métodos de limpieza más agresivos. A continuación se enumeran tres métodos. Es posible que deba probar más de uno de ellos antes de que su cubeta esté limpia.
I. Algunos proveedores suministran sus propias marcas de agentes de limpieza de cubetas, generalmente soluciones de detergentes aniónicos y no iónicos en el rango de pH de 9,5 a 12.
Sus sitios web brindan orientación sobre la limpieza de cubetas y sus protocolos recomendados son buenos. Sin embargo, no siempre son suficientes para eliminar las proteínas de las superficies de las cubetas.
II. «Nano Tira» (de Cyantek)
Use bata de laboratorio, gafas, guantes, zapatos cerrados y pantalones largos, ¡todo mientras trabaja en una campana extractora! Para usar Nano Strip, siga el protocolo de ácido nítrico a continuación usando Nano Strip en su lugar. Tenga cuidado, las pipetas de transferencia de plástico o las puntas planas de carga de gel no resistirán Nano Strip.
tercero Ácido nítrico
Use bata de laboratorio, gafas, guantes, zapatos cerrados y pantalones largos, ¡todo mientras trabaja en una campana extractora!
- Después del uso, saque la cubeta del soporte y extraiga la mayor cantidad posible de muestra con una pipeta de transferencia desechable de punta fina o una punta de carga de gel para microcubetas.
- Enjuague cuatro o cinco veces con tampón o agua purificada (se usa un enjuague con tampón para muestras con proteínas que precipitan en agua purificada). Si se utiliza un enjuague con solución amortiguadora, debe seguir un enjuague adicional con agua purificada.
- Enjuague varias veces con acetona o etanol, luego seque completamente con aire comprimido limpio y seco o nitrógeno.
Nota:
También puede usar una lavadora de cubetas para esto si tiene una. No recomiendo las cubetas centrífugas para el secado.
Es particularmente importante que la cubeta esté completamente seca antes del siguiente paso. Si no es así, ¡el calor de la mezcla de ácido con agua o etanol podría dañar la cubeta! Continúe con los pasos de la cubeta transparente o la cubeta con revestimiento antirreflectante negro a continuación.
Cubetas transparentes (sin recubrimiento negro en el exterior)
- Sumergir en ácido nítrico concentrado, asegurándose de que el aire de la cubeta se desplace completamente con el ácido.
Precaución:
Asegúrese de que el recipiente que contiene el ácido esté claramente marcado con su contenido y se guarde en un lugar seguro. Asegúrese de que la cubeta no se dañe mientras mueve el recipiente.
- Deje la cubeta en remojo durante 10 minutos a 30 minutos (o toda la noche con ácido nítrico 2 M o si usa Nano-Strip en remojo durante 30 minutos).
- Sobre una bandeja de goteo, retire con cuidado la cubeta del ácido con unas pinzas de acero inoxidable, sujetando la cubeta ligeramente por el cuello, no por las superficies ópticas.
- Usando una pipeta de transferencia desechable de punta fina o puntas de carga de gel, retire con cuidado la mayor cantidad posible de ácido de la cubeta. (Nuevamente, Nano-strip no es compatible con pipetas de plástico)
- Enjuague cuidadosamente la cubeta con agua purificada varias veces.
- Después de al menos 7 enjuagues, mida un espectro de fluorescencia de la cubeta llena de agua para comprobar que está limpia usando los parámetros que usaría para medir la muestra de la que provienen las contaminaciones.
- Enjuague la cubeta limpia con acetona o etanol y séquela.
- Limpie el exterior de la cubeta frotando suavemente con papel de limpieza de lentes humedecido con acetona o etanol. Verifique que la cubeta esté limpia sosteniéndola contra la luz. No debe haber contaminación visible ni manchas.
- Si no la necesita de inmediato, almacene la cubeta en un ambiente limpio y seco.
Cubeta con revestimiento antirreflectante negro en el exterior
No sumerja las cubetas recubiertas en ácido nítrico. Los ácidos fuertes (y ciertos solventes) degradarán el recubrimiento.
- Llene la cubeta con ácido asegurándose de que no gotee sobre la superficie exterior utilizando una pipeta de transferencia o una punta de pipeta. Evite las agujas de jeringa de metal o de vidrio, ya que pueden rayar la cubeta.
- Asegurarse de que el aire de la cubeta se desplace por completo con el ácido.
Precaución:
Asegúrese de que el recipiente que contiene el ácido esté claramente marcado con su contenido y se guarde en un lugar seguro. Asegúrese de que la cubeta no se dañe mientras mueve el recipiente.
- Deje en remojo durante 10 minutos a 30 minutos (o toda la noche con ácido nítrico 2 M), (con Nano-Strip 30 minutos debería ser suficiente).
- Usando una pipeta de transferencia desechable de punta fina o puntas de carga de gel, retire con cuidado la mayor cantidad posible de ácido de la cubeta. (Nuevamente, Nano-strip no es compatible con pipetas de plástico)
- Enjuague cuidadosamente la cubeta con agua purificada varias veces.
- Después de al menos 7 enjuagues, mida un espectro de fluorescencia de la cubeta llena de agua para comprobar que está limpia usando los parámetros que usaría para medir la muestra de la que provienen las contaminaciones.
- Enjuague la cubeta limpia con acetona o etanol y séquela.
- Limpie suavemente el exterior de la cubeta con acetona o etanol utilizando un paño suave sin pelusa. Verifique que la cubeta esté limpia sosteniéndola contra la luz. No debe haber contaminación visible ni manchas.
- Si no la necesita de inmediato, almacene la cubeta en un ambiente limpio y seco.
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