Czyszczenie kuwet fluorescencyjnych
Ważny:
Upewnij się, że jakakolwiek próbka/roztwór pozostawiony w kuwecie nie zareaguje gwałtownie z jakimkolwiek roztworem/płynem, którego użyjesz do czyszczenia!
Nie używaj mocnych zasad, takich jak wodorotlenek potasu lub sodu. Mogą uszkodzić kuwety.
A. Próbki rozpuszczalne w wodzie o niskiej masie cząsteczkowej
1) Spłucz oczyszczoną wodą.
2) Następnie spłucz acetonem lub etanolem.
3) Osuszyć czystym, suchym, sprężonym powietrzem lub azotem.
4) Oczyść zewnętrzną powierzchnię kuwety, delikatnie wycierając papierem do czyszczenia soczewek zwilżonym acetonem lub etanolem.
Upewnij się, że w kuwecie nie powstaje ciśnienie. Nie używaj powietrza w domu bez zainstalowanego filtra. Często wystarcza to do oczyszczenia wnętrza kuwety.
Możesz również użyć do tego myjki do kuwet, jeśli ją masz. Nie polecam wirówek kuwetowych do suszenia.
B. Biomakromolekuły
Szczególnie zdenaturowane białka mogą być dość lepkie, a ich usuwanie z powierzchni kwarcowych często wymaga bardziej agresywnych metod czyszczenia. Poniżej wymieniono trzy metody. Może być konieczne wypróbowanie więcej niż jednego z nich, zanim kuweta będzie czysta.
I. Niektórzy dostawcy dostarczają własne marki środków do czyszczenia kuwet, zwykle roztwory detergentów anionowych i niejonowych w zakresie pH od 9,5 do 12.
Ich strony internetowe zawierają wskazówki dotyczące czyszczenia kuwet, a zalecane przez nich protokoły są dobre. Jednak nie zawsze wystarczają do usunięcia białka z powierzchni kuwet.
II. „Nano Strip” (od Cyantka)
Noś fartuch laboratoryjny, gogle, rękawiczki, buty z zakrytymi palcami i długie spodnie, a wszystko to podczas pracy pod wyciągiem! Aby użyć paska Nano Strip, postępuj zgodnie z poniższym protokołem dotyczącym kwasu azotowego, używając paska Nano Strip. Bądź ostrożny, plastikowe pipety transferowe lub płaskie końcówki żelowe nie wytrzymają paska nano.
III. Kwas azotowy
Noś fartuch laboratoryjny, gogle, rękawiczki, buty z zakrytymi palcami i długie spodnie, a wszystko to podczas pracy pod wyciągiem!
- Po użyciu wyjąć kuwetę z uchwytu i usunąć jak najwięcej próbki za pomocą jednorazowej pipety transferowej z cienką końcówką lub końcówki żelowej do mikrokuwet.
- Przemyć cztery lub pięć razy buforem lub wodą oczyszczoną (płukanie buforem jest stosowane w przypadku próbek zawierających białka, które wytrącają się w oczyszczonej wodzie). Jeśli stosuje się płukanie buforem, należy po nim przeprowadzić dalsze płukanie oczyszczoną wodą.
- Przepłucz kilka razy acetonem lub etanolem, a następnie dokładnie przedmuchaj czystym, suchym sprężonym powietrzem lub azotem.
Notatka:
Możesz również użyć do tego myjki do kuwet, jeśli ją masz. Nie polecam wirówek kuwetowych do suszenia.
Szczególnie ważne jest, aby kuweta była całkowicie sucha przed kolejnym krokiem. Jeśli tak nie jest, ciepło z mieszania kwasu z wodą lub etanolem może uszkodzić kuwetę! Kontynuuj z przezroczystą kuwetą lub czarną kuwetą z powłoką antyrefleksyjną poniżej.
Kuwety przezroczyste (bez czarnej powłoki na zewnątrz)
- Zanurz w stężonym kwasie azotowym, upewniając się, że powietrze w kuwecie jest całkowicie wypełnione kwasem.
Ostrożność:
Upewnij się, że naczynie zawierające kwas jest wyraźnie oznaczone jego zawartością i jest przechowywane w bezpiecznym miejscu. Upewnij się, że kuweta nie zostanie uszkodzona podczas przesuwania naczynia.
- Pozostaw kuwetę do namaczania przez 10 minut do 30 minut (lub na noc z 2 M kwasem azotowym lub w przypadku korzystania z Nano-Strip namoczenie 30 minut).
- Nad tacką ociekową ostrożnie wyjąć kuwetę z kwasu za pomocą pęsety ze stali nierdzewnej, chwytając kuwetę lekko za szyjkę, a nie za powierzchnie optyczne.
- Używając jednorazowej pipety transferowej z cienką końcówką lub końcówek do nakładania żelu, ostrożnie usuń z kuwety jak najwięcej kwasu. (Ponownie Nano-strip nie jest kompatybilny z plastikowymi pipetami)
- Starannie kilkakrotnie wypłucz kuwetę oczyszczoną wodą.
- Po co najmniej 7 płukaniach zmierz widmo fluorescencji kuwety wypełnionej wodą, aby udowodnić, że jest ona czysta, używając parametrów, których użyłbyś do pomiaru próbki, z której pochodziły zanieczyszczenia.
- Wypłucz czystą kuwetę acetonem lub etanolem i wysusz.
- Oczyścić zewnętrzną stronę kuwety, przecierając delikatnie papierem do czyszczenia soczewek zwilżonym acetonem lub etanolem. Sprawdź, czy kuweta jest czysta, trzymając ją pod światło. Nie powinno być widocznych zanieczyszczeń ani smug.
- Jeśli nie jest potrzebna od razu, przechowuj kuwetę w czystym, suchym miejscu.
Kuweta z czarną powłoką antyrefleksyjną na zewnątrz
Nie zanurzać kuwet powlekanych w kwasie azotowym. Silne kwasy (i niektóre rozpuszczalniki) niszczą powłokę.
- Napełnij kuwetę kwasem, uważając, aby nie kapał na zewnętrzną powierzchnię za pomocą pipety do przenoszenia lub końcówki do pipety. Unikaj metalowych igieł do strzykawek lub szkła, ponieważ mogą porysować kuwetę.
- Upewnić się, że powietrze w kuwecie jest całkowicie wyparte z kwasem.
Ostrożność:
Upewnij się, że naczynie zawierające kwas jest wyraźnie oznaczone jego zawartością i jest przechowywane w bezpiecznym miejscu. Upewnij się, że kuweta nie zostanie uszkodzona podczas przesuwania naczynia.
- Pozostaw do namoczenia przez 10 minut do 30 min (lub na noc z 2 M kwasem azotowym), (z Nano-Strip 30 min powinno wystarczyć).
- Używając jednorazowej pipety transferowej z cienką końcówką lub końcówek do nakładania żelu, ostrożnie usuń z kuwety jak najwięcej kwasu. (Ponownie Nano-strip nie jest kompatybilny z plastikowymi pipetami)
- Starannie kilkakrotnie wypłucz kuwetę oczyszczoną wodą.
- Po co najmniej 7 płukaniach zmierz widmo fluorescencji kuwety wypełnionej wodą, aby udowodnić, że jest ona czysta, używając parametrów, których użyłbyś do pomiaru próbki, z której pochodziły zanieczyszczenia.
- Wypłucz czystą kuwetę acetonem lub etanolem i wysusz.
- Delikatnie oczyść zewnętrzną stronę kuwety acetonem lub etanolem za pomocą miękkiej, niestrzępiącej się chusteczki. Sprawdź, czy kuweta jest czysta, trzymając ją pod światło. Nie powinno być widocznych zanieczyszczeń ani smug.
- Jeśli nie jest potrzebna od razu, przechowuj kuwetę w czystym, suchym miejscu.
Recent Comments