Tärkeä:
Varmista, että kyvettiin jäänyt näyte/liuos ei reagoi kiivaasti puhdistukseen käyttämäsi liuoksen/nesteen kanssa!

Älä käytä vahvoja emäksiä, kuten kalium- tai natriumhydroksidia. Ne voivat vahingoittaa kyvettejä.

A. Pienimolekyylipainoiset vesiliukoiset näytteet
1) Huuhtele puhdistetulla vedellä.
2) Huuhtele sitten asetonilla tai etanolilla.
3) Kuivaa puhtaalla, kuivalla paineilmalla tai typellä.
4) Puhdista kyvetin ulkopinta pyyhkimällä varovasti asetonilla tai etanolilla kostutetulla linssinpuhdistuspaperilla.

Varmista, että et muodosta painetta kyvetissä. Älä käytä talon ilmaa ilman suodatinta. Tämä riittää usein kyvetin sisäpuolen puhdistamiseen.

Voit käyttää tähän myös kyvettipesuria, jos sinulla on sellainen. En suosittele kyvettisentrifugeja kuivaukseen.

B. Biomakromolekyylit

Erityisesti denaturoidut proteiinit voivat olla melko tahmeita ja niiden poistaminen kvartsipinnoista vaatii usein aggressiivisempia puhdistusmenetelmiä. Alla on lueteltu kolme menetelmää. Saatat joutua kokeilemaan useampaa kuin yhtä niistä, ennen kuin kyvettisi on puhdas.

I. Jotkut toimittajat toimittavat omia tuotemerkkejään kyvetinpuhdistusaineita, yleensä anionisten ja ionittomien pesuaineiden liuoksia pH-alueella 9,5–12.

Heidän verkkosivustonsa antavat ohjeita kyvettien puhdistamiseen, ja heidän suositellut protokollansa ovat hyviä. Ne eivät kuitenkaan aina riitä poistamaan proteiinia kyvetin pinnoilta.

II. “Nano Strip” (Cyantekilta)

Käytä laboratoriotakkia, suojalaseja, käsineitä, umpinahkaa ja pitkiä housuja työskennellessäsi liesituulettimessa! Käytä Nano Strippiä noudattamalla alla olevaa typpihappoprotokollaa käyttämällä Nano Strip -nauhaa. Ole varovainen, muoviset siirtopipetit tai litteät geelitäyttökärjet eivät kestä nanonauhaa.

III. Typpihappo

Käytä laboratoriotakkia, suojalaseja, käsineitä, umpinahkaa ja pitkiä housuja työskennellessäsi liesituulettimessa!

• Käytön jälkeen ota kyvetti pidikkeestä ja ota mahdollisimman paljon näytettä käyttämällä hienokärkistä kertakäyttöistä siirtopipettiä tai mikrokyvettien geelitäyttökärkeä.
• Huuhtele neljä tai viisi kertaa joko puskurilla tai puhdistetulla vedellä (puskurihuuhtelua käytetään näytteille, joissa on proteiineja, jotka saostuvat puhdistettuun veteen). Jos käytetään puskurihuuhtelua, sen jälkeen tulee suorittaa lisähuuhtelu puhdistetulla vedellä.
• Huuhtele useita kertoja asetonilla tai etanolilla ja kuivaa sitten perusteellisesti puhtaalla kuivalla paineilmalla tai typellä.

Huomautus:
Voit käyttää tähän myös kyvettipesuria, jos sinulla on sellainen. En suosittele kyvettisentrifugeja kuivaukseen.

On erityisen tärkeää, että kyvetti on täysin kuiva ennen seuraavaa vaihetta. Jos näin ei ole, hapon ja veden tai etanolin sekoittamisesta aiheutuva lämpö voi vahingoittaa kyvettiä! Jatka joko kirkkaan kyvetin tai mustan heijastuksenestopinnoitteen kyvetin alla olevilla vaiheilla.

Kirkkaat kyvetit (ei mustaa pinnoitetta ulkopuolella)

• Upota väkevään typpihappoon ja varmista, että kyvetin ilma on täysin syrjäytynyt hapon mukana.

Varoitus:
Varmista, että happoa sisältävässä astiassa on selkeä merkintä sen sisällöstä ja että sitä säilytetään turvallisessa paikassa. Varmista, että kyvetti ei vaurioidu siirtäessäsi astiaa ympäriinsä.

• Anna kyvetin liota 10 minuuttia – 30 minuuttia (tai yön yli 2 M typpihapolla tai jos käytät Nano-Strip -liuosta 30 minuuttia).
• Poista kyvetti varovasti tippa-alustalla haposta ruostumattomasta teräksestä valmistetuilla pinseteillä pitäen kyvettiä kevyesti kaulasta, ei optisista pinnoista.
• Käytä hienokärkistä kertakäyttöistä siirtopipettiä tai geelin täyttökärkiä ja poista varovasti mahdollisimman paljon happoa kyvetistä. (Taas Nano-nauha ei ole yhteensopiva muovipipettien kanssa)
• Huuhtele kyvetti varovasti puhdistetulla vedellä useita kertoja.
• Mittaa vähintään 7 huuhtelun jälkeen vedellä täytetyn kyvetin fluoresenssispektri varmistaaksesi, että se on puhdas käyttämällä parametrejä, joita käyttäisit mittaaessasi näytteen, josta kontaminaatiot ovat peräisin.
• Huuhtele puhdas kyvetti asetonilla tai etanolilla ja kuivaa.
• Puhdista kyvetin ulkopinta pyyhkimällä varovasti asetonilla tai etanolilla kostutetulla linssinpuhdistuspaperilla. Tarkista, että kyvetti on puhdas pitämällä sitä valoa vasten. Ei saa olla näkyvää likaa tai tahroja.
• Jos sitä ei tarvita heti, säilytä kyvetti puhtaassa, kuivassa ympäristössä.

Kyvetti, jossa musta heijastamaton pinnoite ulkopuolella

Älä upota päällystettyjä kyvettejä typpihappoon. Vahvat hapot (ja tietyt liuottimet) heikentävät pinnoitetta.

• Täytä kyvetti hapolla siirtopipetillä tai pipetin kärjellä varoen tippumasta sen ulkopinnalle. Vältä metalliruiskun neuloja tai lasia, koska ne voivat naarmuttaa kyvettiä.
• Varmista, että ilma kyvetissä on täysin syrjäytynyt hapon mukana.

Varoitus:
Varmista, että happoa sisältävässä astiassa on selkeä merkintä sen sisällöstä ja että sitä säilytetään turvallisessa paikassa. Varmista, että kyvetti ei vaurioidu siirtäessäsi astiaa ympäriinsä.

• Anna liota 10 minuutista 30 minuuttiin (tai yön yli 2 M typpihapolla) (Nano-Stripillä 30 min pitäisi riittää).
• Käytä hienokärkistä kertakäyttöistä siirtopipettiä tai geelin täyttökärkiä ja poista varovasti mahdollisimman paljon happoa kyvetistä. (Taas Nano-nauha ei ole yhteensopiva muovipipettien kanssa)
• Huuhtele kyvetti varovasti puhdistetulla vedellä useita kertoja.
• Mittaa vähintään 7 huuhtelun jälkeen vedellä täytetyn kyvetin fluoresenssispektri varmistaaksesi, että se on puhdas käyttämällä parametrejä, joita käyttäisit mittaaessasi näytteen, josta kontaminaatiot ovat peräisin.
• Huuhtele puhdas kyvetti asetonilla tai etanolilla ja kuivaa.
• Puhdista kyvetin ulkopuoli varovasti asetonilla tai etanolilla käyttämällä pehmeää nukkaamatonta liinaa. Tarkista, että kyvetti on puhdas pitämällä sitä valoa vasten. Ei saa olla näkyvää likaa tai tahroja.
• Jos sitä ei tarvita heti, säilytä kyvetti puhtaassa, kuivassa ympäristössä.

Lähde