Fluorescenskyvettrengöring
Viktig:
Se till att eventuellt prov/lösning som du kan ha kvar i din kyvett inte kommer att reagera våldsamt med vilken lösning/vätska du än kommer att använda för rengöring!
Använd inte starka baser som kalium eller natriumhydroxid. De kan skada kyvetterna.
A. Vattenlösliga prover med låg molekylvikt
1) Skölj med renat vatten.
2) Skölj sedan med aceton eller etanol.
3) Föna med ren, torr, tryckluft eller kväve.
4) Rengör utsidan av kyvetten genom att torka försiktigt med linsrengöringspapper fuktat med aceton eller etanol.
Se till att du inte bygger upp tryck i kyvetten. Använd inte husluft utan att ha ett filter installerat. Detta är ofta tillräckligt för att rengöra kyvettens insida.
Du kan även använda en kyvettbricka för detta om du har en. Jag rekommenderar inte kyvettcentrifuger för torkning.
B. Biomakromolekyler
Särskilt denaturerade proteiner kan vara ganska klibbiga och avlägsnande av dem från kvartsytor kräver ofta mer aggressiva rengöringsmetoder. Tre metoder listas nedan. Du kan behöva prova mer än en av dem innan din kyvett är ren.
I. Vissa leverantörer tillhandahåller sina egna märken av kyvettrengöringsmedel, vanligtvis lösningar av anjoniska och nonjoniska rengöringsmedel i pH-intervallet 9,5 till 12.
Deras webbplatser ger vägledning om kyvettrengöring och deras rekommenderade protokoll är bra. De är dock inte alltid tillräckliga för att ta bort protein från kyvettytor.
II. ”Nano Strip” (från Cyantek)
Bär labbrock, skyddsglasögon, handskar, skor med slutna tår och långbyxor, allt medan du arbetar i ett dragskåp! För att använda Nano Strip följ Nitric Acid-protokollet nedan med Nano Strip istället. Var försiktig, överföringspipetter av plast eller platta gelladdningsspetsar håller inte mot Nano Strip.
III. Salpetersyra
Bär labbrock, skyddsglasögon, handskar, skor med slutna tår och långbyxor, allt medan du arbetar i ett dragskåp!
- Efter användning, ta kyvetten från hållaren och ta bort så mycket av provet som möjligt med en finspetsad engångsöverföringspipett eller en gelladdningsspets för mikrokyvetter.
- Skölj fyra eller fem gånger med antingen buffert eller renat vatten (en buffertsköljning används för prover med proteiner som fälls ut i renat vatten). Om en buffertsköljning används ska den följas av ytterligare sköljning med renat vatten.
- Skölj flera gånger med aceton eller etanol och föna sedan ordentligt med ren torr tryckluft eller kväve.
Notera:
Du kan även använda en kyvettbricka för detta om du har en. Jag rekommenderar inte kyvettcentrifuger för torkning.
Det är särskilt viktigt att kyvetten är helt torr innan nästa steg. Om den inte är det kan värme från att blanda syra med vatten eller etanol skada kyvetten! Fortsätt med antingen den genomskinliga kyvetten eller den svarta antireflekterande kyvettstegen nedan.
Klara kyvetter (ingen svart beläggning på utsidan)
- Sänk ned i koncentrerad salpetersyra och se till att luften i kyvetten är helt förskjuten med syran.
Varning:
Se till att kärlet som innehåller syran är tydligt märkt med dess innehåll och förvaras på en säker plats. Se till att kyvetten inte skadas när du flyttar runt kärlet.
- Låt kyvetten dra i 10 minuter till 30 minuter (eller över natten med 2 M salpetersyra eller om du använder Nano-Strip blötlägg 30 minuter).
- Över en droppbricka, ta försiktigt bort kyvetten från syran med en pincett i rostfritt stål, greppa kyvetten lätt i halsen, inte i de optiska ytorna.
- Använd en överföringspipett med fin spets eller gelladdningsspetsar, ta försiktigt bort så mycket av syran som möjligt från kyvetten. (Återigen är Nano-strip inte kompatibel med plastpipetter)
- Skölj försiktigt kyvetten med renat vatten flera gånger.
- Efter minst 7 sköljningar, mät ett fluorescensspektrum av den vattenfyllda kyvetten för att bevisa att den är ren med de parametrar du skulle använda för att mäta provet från vilket föroreningarna kom.
- Skölj den rena kyvetten med aceton eller etanol och torka den.
- Rengör utsidan av kyvetten genom att torka försiktigt med linsrengöringspapper fuktat med aceton eller etanol. Kontrollera att kyvetten är ren genom att hålla upp den mot ljuset. Det ska inte finnas några synliga föroreningar eller utstryk.
- Om det inte behövs omedelbart, förvara kyvetten i en ren, torr miljö.
Kyvett med svart antireflexbeläggning på utsidan
Doppa inte belagda kyvetter i salpetersyra. Starka syror (och vissa lösningsmedel) kommer att försämra beläggningen.
- Fyll kyvetten med syra och se till att det inte droppar något på utsidan med en överföringspipett eller pipettspets. Undvik metallsprutnålar eller glas eftersom de kan repa kyvetten.
- Se till att luften i kyvetten är helt förskjuten med syran.
Varning:
Se till att kärlet som innehåller syran är tydligt märkt med dess innehåll och förvaras på en säker plats. Se till att kyvetten inte skadas när du flyttar runt kärlet.
- Låt dra i 10 minuter till 30 minuter (eller över natten med 2 M salpetersyra), (med Nano-Strip bör 30 minuter vara tillräckligt).
- Använd en överföringspipett med fin spets eller gelladdningsspetsar, ta försiktigt bort så mycket av syran som möjligt från kyvetten. (Återigen är Nano-strip inte kompatibel med plastpipetter)
- Skölj försiktigt kyvetten med renat vatten flera gånger.
- Efter minst 7 sköljningar, mät ett fluorescensspektrum av den vattenfyllda kyvetten för att bevisa att den är ren med de parametrar du skulle använda för att mäta provet från vilket föroreningarna kom.
- Skölj den rena kyvetten med aceton eller etanol och torka den.
- Rengör försiktigt utsidan av kyvetten med aceton eller etanol med en mjuk luddfri väv. Kontrollera att kyvetten är ren genom att hålla upp den mot ljuset. Det ska inte finnas några synliga föroreningar eller utstryk.
- Om det inte behövs omedelbart, förvara kyvetten i en ren, torr miljö.
Recent Comments