Nettoyage des cuvettes de fluorescence
Important:
Assurez-vous que tout échantillon/solution que vous pourriez avoir laissé dans votre cuvette ne réagira pas violemment avec la solution/le liquide que vous utiliserez pour le nettoyage !
N’utilisez pas de bases fortes telles que l’hydroxyde de potassium ou de sodium. Ils peuvent endommager les cuvettes.
A. Échantillons solubles dans l’eau de faible poids moléculaire
1) Rincer à l’eau purifiée.
2) Ensuite, rincez à l’acétone ou à l’éthanol.
3) Séchez avec de l’air comprimé propre et sec ou de l’azote.
4) Nettoyez l’extérieur de la cuvette en l’essuyant délicatement avec du papier de nettoyage pour objectif imbibé d’acétone ou d’éthanol.
Assurez-vous de ne pas créer de pression dans la cuvette. N’utilisez pas l’air de la maison sans avoir installé un filtre. Ceci est souvent suffisant pour nettoyer l’intérieur de la cuvette.
Vous pouvez également utiliser un laveur de cuvette pour cela si vous en avez un. Je ne recommande pas les centrifugeuses à cuvette pour le séchage.
B. Biomacromolécules
Les protéines particulièrement dénaturées peuvent être assez collantes et leur élimination des surfaces de quartz nécessite souvent des méthodes de nettoyage plus agressives. Trois méthodes sont énumérées ci-dessous. Vous devrez peut-être en essayer plusieurs avant que votre cuvette soit propre.
I. Certains fournisseurs proposent leurs propres marques d’agents de nettoyage pour cuvettes, généralement des solutions de détergents anioniques et non ioniques dans la plage de pH de 9,5 à 12.
Leurs sites Web donnent des conseils sur le nettoyage des cuvettes et leurs protocoles recommandés sont bons. Cependant, ils ne suffisent pas toujours à éliminer les protéines des surfaces des cuvettes.
II. “Nano Strip” (de Cyantek)
Portez une blouse de laboratoire, des lunettes, des gants, des chaussures fermées et un pantalon long, tout en travaillant sous une hotte ! Pour utiliser Nano Strip, suivez le protocole d’acide nitrique ci-dessous en utilisant Nano Strip à la place. Attention, les pipettes de transfert en plastique ou les embouts de chargement de gel plats ne résisteront pas au Nano Strip.
III. Acide nitrique
Portez une blouse de laboratoire, des lunettes, des gants, des chaussures fermées et un pantalon long, tout en travaillant sous une hotte !
- Après utilisation, retirer la cuvette du support et prélever le plus possible d’échantillon à l’aide d’une pipette de transfert jetable à pointe fine ou d’un embout de chargement de gel pour microcuvettes.
- Rincer quatre ou cinq fois avec un tampon ou de l’eau purifiée (un rinçage tampon est utilisé pour les échantillons contenant des protéines qui précipitent dans l’eau purifiée). Si un rinçage tampon est utilisé, il doit être suivi d’un rinçage supplémentaire avec de l’eau purifiée.
- Rincer plusieurs fois avec de l’acétone ou de l’éthanol, puis sécher soigneusement avec de l’air comprimé propre et sec ou de l’azote.
Noter:
Vous pouvez également utiliser un laveur de cuvette pour cela si vous en avez un. Je ne recommande pas les centrifugeuses à cuvette pour le séchage.
Il est particulièrement important que la cuvette soit complètement sèche avant l’étape suivante. Si ce n’est pas le cas, la chaleur du mélange de l’acide avec de l’eau ou de l’éthanol pourrait endommager la cuvette ! Continuez avec les étapes ci-dessous pour la cuvette transparente ou la cuvette à revêtement antireflet noir.
Cuvettes transparentes (pas de revêtement noir à l’extérieur)
- Plonger dans de l’acide nitrique concentré, en s’assurant que l’air dans la cuvette est entièrement déplacé avec l’acide.
Mise en garde:
Assurez-vous que le récipient contenant l’acide est clairement identifié avec son contenu et est stocké dans un endroit sûr. Assurez-vous que la cuvette n’est pas endommagée lors du déplacement du récipient.
- Laisser tremper la cuvette pendant 10 minutes à 30 min (ou toute la nuit avec de l’acide nitrique 2 M ou si vous utilisez Nano-Strip tremper 30 min).
- Au-dessus d’un bac d’égouttement, retirez soigneusement la cuvette de l’acide à l’aide d’une pince à épiler en acier inoxydable, en saisissant légèrement la cuvette par le cou, et non par les surfaces optiques.
- À l’aide d’une pipette de transfert jetable à pointe fine ou d’embouts de chargement de gel, retirez soigneusement autant d’acide que possible de la cuvette. (Encore une fois Nano-strip n’est pas compatible avec les pipettes en plastique)
- Rincer soigneusement la cuvette avec de l’eau purifiée plusieurs fois.
- Après au moins 7 rinçages, mesurez un spectre de fluorescence de la cuvette remplie d’eau pour prouver qu’elle est propre en utilisant les paramètres que vous utiliseriez pour mesurer l’échantillon d’où proviennent les contaminations.
- Rincer la cuvette propre avec de l’acétone ou de l’éthanol et la sécher.
- Nettoyez l’extérieur de la cuvette en l’essuyant délicatement avec du papier de nettoyage pour objectif humidifié avec de l’acétone ou de l’éthanol. Vérifiez que la cuvette est propre en la tenant à la lumière. Il ne doit pas y avoir de contamination ou de frottis visible.
- Si vous n’en avez pas besoin immédiatement, stockez la cuvette dans un environnement propre et sec.
Cuvette avec revêtement antireflet noir à l’extérieur
Ne plongez pas les cuvettes revêtues dans de l’acide nitrique. Les acides forts (et certains solvants) dégraderont le revêtement.
- Remplir la cuvette d’acide en veillant à ne pas couler sur la surface extérieure à l’aide d’une pipette de transfert ou d’un embout de pipette. Évitez les aiguilles de seringue en métal ou le verre car ils pourraient rayer la cuvette.
- Assurez-vous que l’air dans la cuvette est complètement déplacé avec l’acide.
Mise en garde:
Assurez-vous que le récipient contenant l’acide est clairement identifié avec son contenu et est stocké dans un endroit sûr. Assurez-vous que la cuvette n’est pas endommagée lors du déplacement du récipient.
- Laisser tremper pendant 10 minutes à 30 min (ou toute la nuit avec de l’acide nitrique 2 M), (avec Nano-Strip 30 min devraient suffire).
- À l’aide d’une pipette de transfert jetable à pointe fine ou d’embouts de chargement de gel, retirez soigneusement autant d’acide que possible de la cuvette. (Encore une fois Nano-strip n’est pas compatible avec les pipettes en plastique)
- Rincer soigneusement la cuvette avec de l’eau purifiée plusieurs fois.
- Après au moins 7 rinçages, mesurez un spectre de fluorescence de la cuvette remplie d’eau pour prouver qu’elle est propre en utilisant les paramètres que vous utiliseriez pour mesurer l’échantillon d’où proviennent les contaminations.
- Rincer la cuvette propre avec de l’acétone ou de l’éthanol et la sécher.
- Nettoyez délicatement l’extérieur de la cuvette avec de l’acétone ou de l’éthanol à l’aide d’un chiffon doux non pelucheux. Vérifiez que la cuvette est propre en la tenant face à la lumière. Il ne doit pas y avoir de contamination ou de frottis visible.
- Si vous n’en avez pas besoin immédiatement, stockez la cuvette dans un environnement propre et sec.
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