Fluorescentie-kuvettenreiniging
Belangrijk:
Zorg ervoor dat elk monster/oplossing die u in uw cuvet heeft achtergelaten niet heftig reageert met de oplossing/vloeistof die u voor het reinigen gebruikt!
Gebruik geen sterke basen zoals kalium- of natriumhydroxide. Ze kunnen de cuvetten beschadigen.
A. In water oplosbare monsters met laag molecuulgewicht
1) Spoel af met gezuiverd water.
2) Spoel vervolgens af met aceton of ethanol.
3) Blaas droog met schone, droge perslucht of stikstof.
4) Reinig de buitenkant van de cuvet door deze voorzichtig af te vegen met lensreinigingspapier dat bevochtigd is met aceton of ethanol.
Zorg ervoor dat u geen druk opbouwt in de kuvet. Gebruik geen huislucht zonder dat er een filter is geïnstalleerd. Vaak is dit voldoende om de binnenkant van de cuvet te reinigen.
U kunt hiervoor ook een kuvettenwasser gebruiken als u die heeft. Ik raad kuvettencentrifuges niet aan om te drogen.
B. Biomacromoleculen
Vooral gedenatureerde eiwitten kunnen behoorlijk plakkerig zijn en hun verwijdering van kwartsoppervlakken vereist vaak agressievere reinigingsmethoden. Hieronder worden drie methoden genoemd. Mogelijk moet u er meer dan één proberen voordat uw cuvet schoon is.
I. Sommige leveranciers leveren kuvettenreinigers van hun eigen merk, meestal oplossingen van anionische en niet-ionische reinigingsmiddelen in het pH-bereik van 9,5 tot 12.
Hun websites geven advies over het reinigen van kuvetten en hun aanbevolen protocollen zijn goed. Ze zijn echter niet altijd voldoende om eiwit van cuvetteoppervlakken te verwijderen.
II. “Nanostrook” (van Cyantek)
Draag een laboratoriumjas, een veiligheidsbril, handschoenen, schoenen met gesloten tenen en een lange broek, terwijl u in een zuurkast werkt! Om Nano Strip te gebruiken, volgt u het onderstaande salpeterzuurprotocol en gebruikt u in plaats daarvan Nano Strip. Wees voorzichtig, plastic transferpipetten of platte gellaadtips zijn niet geschikt voor Nano Strip.
III. Salpeterzuur
Draag een laboratoriumjas, een veiligheidsbril, handschoenen, schoenen met gesloten tenen en een lange broek, terwijl u in een zuurkast werkt!
- Neem na gebruik de cuvet uit de houder en verwijder zoveel mogelijk van het monster met behulp van een wegwerptransferpipet met fijne punt of een gellaadpunt voor microcuvetten.
- Spoel vier of vijf keer met buffer of gezuiverd water (een bufferspoeling wordt gebruikt voor monsters met eiwitten die in gezuiverd water neerslaan). Als een bufferspoeling wordt gebruikt, moet deze worden gevolgd door verder spoelen met gezuiverd water.
- Meerdere keren naspoelen met aceton of ethanol, daarna grondig droogblazen met schone, droge perslucht of stikstof.
Opmerking:
U kunt hiervoor ook een kuvettenwasser gebruiken als u die heeft. Ik raad kuvettencentrifuges niet aan om te drogen.
Het is vooral belangrijk dat de cuvet volledig droog is voor de volgende stap. Als dit niet het geval is, kan de hitte van het mengen van zuur met water of ethanol de kuvet beschadigen! Ga verder met de stappen voor de heldere cuvet of zwarte antireflectiecoating hieronder.
Heldere cuvetten (geen zwarte coating aan de buitenkant)
- Dompel onder in geconcentreerd salpeterzuur en zorg ervoor dat de lucht in de cuvet volledig wordt verdrongen door het zuur.
Voorzichtigheid:
Zorg ervoor dat het vat met het zuur duidelijk is gemarkeerd met de inhoud en op een veilige plaats wordt bewaard. Zorg ervoor dat de cuvet niet beschadigd raakt tijdens het verplaatsen van het vat.
- Laat de kuvet 10 minuten tot 30 minuten weken (of ‘s nachts met 2 M salpeterzuur of bij gebruik van Nano-Strip 30 minuten weken).
- Haal de cuvet op een lekbak voorzichtig uit het zuur met een roestvrijstalen pincet, waarbij u de cuvet lichtjes bij de hals vastpakt, niet bij de optische oppervlakken.
- Verwijder voorzichtig zoveel mogelijk zuur uit de cuvet met behulp van een wegwerptransferpipet met fijne punt of gellaadtips. (Nogmaals Nano-strip is niet compatibel met plastic pipetten)
- Spoel de cuvet meerdere keren zorgvuldig uit met gezuiverd water.
- Meet na minimaal 7 spoelbeurten een fluorescentiespectrum van de met water gevulde kuvet om te bewijzen dat deze schoon is met behulp van de parameters die u zou gebruiken voor het meten van het monster waarvan de verontreinigingen afkomstig zijn.
- Spoel de schone cuvet af met aceton of ethanol en droog deze af.
- Reinig de buitenkant van de cuvet door deze voorzichtig af te vegen met lensreinigingspapier dat bevochtigd is met aceton of ethanol. Controleer of de cuvet schoon is door deze tegen het licht te houden. Er mogen geen zichtbare verontreinigingen of uitstrijkjes zijn.
- Als het niet onmiddellijk nodig is, bewaar de cuvet dan in een schone, droge omgeving.
Cuvette met zwarte antireflectiecoating aan de buitenkant
Dompel gecoate kuvetten niet onder in salpeterzuur. Sterke zuren (en bepaalde oplosmiddelen) zullen de coating aantasten.
- Vul de cuvet met zuur en zorg ervoor dat er geen zuur op het buitenoppervlak druppelt met behulp van een transferpipet of pipetpunt. Vermijd metalen injectienaalden of glas, aangezien deze de cuvet kunnen beschadigen.
- Zorg ervoor dat de lucht in de cuvet volledig wordt verdrongen door het zuur.
Voorzichtigheid:
Zorg ervoor dat het vat met het zuur duidelijk is gemarkeerd met de inhoud en op een veilige plaats wordt bewaard. Zorg ervoor dat de cuvet niet beschadigd raakt tijdens het verplaatsen van het vat.
- Laat 10 minuten tot 30 minuten weken (of ‘s nachts met 2 M salpeterzuur), (met Nano-Strip moet 30 minuten voldoende zijn).
- Verwijder voorzichtig zoveel mogelijk zuur uit de cuvet met behulp van een wegwerptransferpipet met fijne punt of gellaadtips. (Nogmaals Nano-strip is niet compatibel met plastic pipetten)
- Spoel de cuvet meerdere keren zorgvuldig uit met gezuiverd water.
- Meet na minimaal 7 spoelbeurten een fluorescentiespectrum van de met water gevulde kuvet om te bewijzen dat deze schoon is met behulp van de parameters die u zou gebruiken voor het meten van het monster waarvan de verontreinigingen afkomstig zijn.
- Spoel de schone cuvet af met aceton of ethanol en droog deze af.
- Reinig de buitenkant van de cuvet voorzichtig met aceton of ethanol met een zachte, pluisvrije tissue. Controleer of de cuvet schoon is door deze tegen het licht te houden. Er mogen geen zichtbare verontreinigingen of uitstrijkjes zijn.
- Als het niet onmiddellijk nodig is, bewaar de cuvet dan in een schone, droge omgeving.
Recent Comments