Hogyan lehet leküzdeni az interferenciákat az UV – látható spektroszkópiai vizsgálatok során?
Ideális esetben az egyetlen analitot tartalmazó oldat abszorbanciaspektrumának egyetlen abszorpciós sávnak kell lennie a maximális abszorbancia hullámhosszán. A valós mintákban azonban a spektrumot befolyásolja más zavaró fajok jelenléte. Az ilyen interferenciák könnyen kiküszöbölhetők a cikkben tárgyalt különböző megközelítések alkalmazásával.
Az UV-látható spektroszkópiában előforduló interferencia számos tényezőből adódik, amelyek lehetnek fizikai vagy kémiai természetűek. A kémiai interferenciák az elsődleges abszorbeáló molekula közvetlen közelében abszorbeáló vegyület egyetlen vagy csoportjának jelenlétéből fakadnak. Másrészt a fizikai interferencia általában a mintában lévő lebegő szilárd szennyeződésekből adódik, amelyek szóródáshoz vezethetnek.
Fizikai interferenciák
A fényszóródást az abszorbeáló oldatban lévő szuszpendált szennyeződések okozzák. Ez olyan háttérabszorbanciát eredményez, amely csökkenti a vizsgált analit abszorbanciáját. A minták szűrése vagy centrifugálása az abszorbanciamérés előtt kézenfekvő megoldásnak tűnik, de ez nem praktikus megközelítés, ha csak μl méretű minták állnak rendelkezésre. A szórás miatti abszorbanciaveszteség csökkenthető a minta és a detektor közötti rés csökkentésével.
Kémiai interferenciák
Kémiai interferenciát okozhat a fényelnyelő oldatban egyetlen vagy több elnyelő egység jelenléte.
Izoabszorbancia mérések
Abban az esetben, ha ismert abszorbancia jellemzőkkel rendelkező zavaró vegyület van jelen, akkor a fő analittal való interferenciája kiküszöbölhető egy olyan hullámhossz kiválasztásával, ahol a zavaró vegyület némi abszorbanciát mutat, mint az analitikai hullámhosszon. analitikai hullámhosszon a maradék abszorbancia az analit helyes abszorbanciája. Ez a megközelítés akkor praktikus, ha csak egyetlen interferencia van jelen, és ha annak maximális abszorbancia hullámhossza távol esik az analit elnyelő hullámhosszától.
Többkomponensű interferencia
A többkomponensű elemzés akkor alkalmazható, ha egynél több interferencia van jelen, és jelentős spektrális átfedés van a fő analit spektrumával. A tiszta interferencia abszorbanciáját le kell vonni a mért abszorbanciából, hogy megkapjuk a vizsgált analit valódi abszorbanciáját,
Hárompontos korrekció
Ebben a módszerben két hullámhosszt választunk ki az analitikai hullámhosszhoz közel, de annak mindkét oldalán. A háttér interferenciája lineáris interpolációval pontosan megbecsülhető. A módszer különösen a komplex mintamátrixokból származó nemlineáris háttérabszorbanciákra alkalmazható.
Derivatív spektroszkópia
A háttér- és zajkorrekció messze legkényelmesebb módja a derivált spektroszkópia. Az első derivált inflexiós pontja a maximális abszorbancia hullámhosszának felel meg, a második derivált pedig a negatív alakú csúcs csúcsaként jelenik meg. Ez segít megkülönböztetni a nagyon szorosan elhelyezkedő vagy egymást átfedő abszorbanciacsúcsokat. Az első derivált tovább küszöböli ki az alapvonal-eltolódásokat, ha vannak ilyenek, és ez segít a kvantitatív elemzés pontosságának javításában. Az alapvonal-eltolódáson kívül a derivált spektroszkópia segít leküzdeni az egyéb azonosítatlan zavaró vegyületekből származó szóródás hatásait is.
Recent Comments