Interferencias Físicas

La dispersión de la luz es causada por la presencia de impurezas suspendidas en la solución absorbente. Da como resultado una absorbancia de fondo que reduce la absorbancia del analito de interés. La filtración o centrifugación de las muestras antes de realizar las mediciones de absorbancia parece ser la solución obvia, pero no es un enfoque práctico cuando solo se dispone de muestras de tamaño µl. La pérdida de absorbancia debida a la dispersión se puede reducir reduciendo el espacio entre la muestra y el detector.

Interferencias químicas

Las interferencias químicas pueden resultar de la presencia de una sola o un grupo de entidades absorbentes en la solución absorbente de luz.

Mediciones de isoabsorbancia

En caso de que esté presente un compuesto que interfiere con características de absorbancia conocidas, su interferencia con el analito principal puede eliminarse seleccionando una longitud de onda en la que el compuesto que interfiere muestra algo de absorbancia como lo hace en la longitud de onda analítica. Al restar la absorbancia en esta longitud de onda de la absorbancia en longitud de onda analítica la absorbancia residual es la absorbancia correcta del analito. Este enfoque es práctico si solo está presente un único interferente y si su longitud de onda de absorbancia máxima está muy alejada de la longitud de onda de absorción del analito.

Interferencia multicomponente

El análisis multicomponente es aplicable cuando está presente más de un interferente y existe una superposición espectral considerable con los espectros del analito principal. La absorbancia del interferente puro se resta de la absorbancia medida para llegar a la absorbancia real del analito de interés.

Corrección de tres puntos

En este método, se seleccionan dos longitudes de onda cercanas a la longitud de onda analítica pero a ambos lados de ella. La interferencia del fondo se puede estimar con precisión mediante interpolación lineal. El método es aplicable particularmente para absorbancias de fondo no lineales resultantes de matrices de muestras complejas.

Espectroscopia derivada

Con mucho, el enfoque más conveniente para la corrección de fondo y ruido es la espectroscopia derivada. El punto de inflexión de la primera derivada corresponde a la longitud de onda de máxima absorbancia y la segunda derivada aparece como la punta del pico de forma negativa. Esto ayuda a diferenciar entre picos de absorbancia superpuestos o muy poco espaciados. La primera derivada elimina aún más los cambios de línea base, si los hay, y esto ayuda a mejorar la precisión del análisis cuantitativo. Además del cambio de línea base, la espectroscopia derivada también ayuda a superar los efectos de la dispersión de otros compuestos de interferencia no identificados.

Fuente