Idealiter zou het absorptiespectrum van een oplossing die een enkele analyt bevat een enkele absorptieband moeten zijn bij de golflengte van maximale absorptie. In echte monsters wordt het spectrum echter beïnvloed door de aanwezigheid van andere storende soorten. Dergelijke interferenties kunnen eenvoudig worden geëlimineerd door verschillende benaderingen te volgen die in het artikel worden beschreven.

Interferenties in UV-zichtbare spectroscopie zijn het gevolg van verschillende factoren die zowel fysisch als chemisch van aard kunnen zijn. Chemische interferenties zijn het gevolg van de aanwezigheid van een enkele of een groep verbindingen die absorberen in de onmiddellijke nabijheid van het primaire absorberende molecuul. Aan de andere kant komen fysieke interferenties in het algemeen voort uit gesuspendeerde vaste onzuiverheden in het monster die tot verstrooiing kunnen leiden.

Fysieke interferenties

Verstrooiing van licht wordt veroorzaakt door de aanwezigheid van gesuspendeerde onzuiverheden in de absorberende oplossing. Het resulteert in een achtergrondabsorptie die de absorptie van de van belang zijnde analyt vermindert. Filteren of centrifugeren van monsters voorafgaand aan het uitvoeren van absorptiemetingen lijkt de voor de hand liggende oplossing, maar dit is geen praktische benadering wanneer alleen monsters van l-grootte beschikbaar zijn. Het verlies aan absorptie als gevolg van verstrooiing kan worden verminderd door de opening tussen het monster en de detector te verkleinen.

Chemische interferenties

Chemische interferenties kunnen het gevolg zijn van de aanwezigheid van een enkele of een groep absorberende entiteiten in de lichtabsorberende oplossing.

Isoabsorptiemetingen

In het geval dat een interfererende verbinding aanwezig is met bekende absorptie-eigenschappen, kan de interferentie met de hoofdanalyt worden geëlimineerd door een golflengte te selecteren waarbij de interfererende verbinding enige absorptie vertoont zoals bij analytische golflengte. Door de absorptie bij deze golflengte af te trekken van de absorptie bij analytische golflengte de resterende absorptie is de juiste absorptie van de analyt. Deze benadering is praktisch als er slechts een enkele interfererende stof aanwezig is en als de maximale absorptiegolflengte ver verwijderd is van de absorptiegolflengte van de analyt.

Interferentie met meerdere componenten

Multicomponent-analyse is toepasbaar wanneer meer dan één interfererende stof aanwezig is en er een aanzienlijke spectrale overlap is met de spectra van de hoofdanalyt. De absorptie van pure interfererende stof wordt afgetrokken van de gemeten absorptie om te komen tot de werkelijke absorptie van de analyt van belang,

Driepuntscorrectie

Bij deze methode worden twee golflengten geselecteerd die dicht bij de analytische golflengte liggen, maar aan weerszijden ervan. De interferentie van de achtergrond kan nauwkeurig worden geschat met behulp van lineaire interpolatie. De methode is met name toepasbaar voor niet-lineaire achtergrondabsorpties die het gevolg zijn van complexe monstermatrices.

Afgeleide spectroscopie

Veruit de handigste benadering voor achtergrond- en ruiscorrectie is afgeleide spectroscopie. Het buigpunt van de eerste afgeleide komt overeen met de golflengte van maximale absorptie en de tweede afgeleide verschijnt als de punt van de negatief gevormde piek. Dit helpt onderscheid te maken tussen zeer dicht bij elkaar gelegen of overlappende absorptiepieken. De eerste afgeleide elimineert verder eventuele basislijnverschuivingen, en dit helpt de nauwkeurigheid van kwantitatieve analyse te verbeteren. Naast basislijnverschuiving helpt afgeleide spectroscopie ook om de effecten van verstrooiing door andere niet-geïdentificeerde interfererende verbindingen te overwinnen.

Bron