Ihannetapauksessa yhden analyytin sisältävän liuoksen absorbanssispektrin tulisi olla yksi absorptiokaista maksimiabsorbanssin aallonpituudella. Todellisissa näytteissä spektriin vaikuttaa kuitenkin muiden häiritsevien lajien läsnäolo. Tällaiset häiriöt voidaan helposti poistaa ottamalla käyttöön erilaisia artikkelissa käsiteltyjä lähestymistapoja.

Häiriöt UV-näkyvässä spektroskopiassa johtuvat useista tekijöistä, jotka voivat olla luonteeltaan sekä fysikaalisia että kemiallisia. Kemialliset häiriöt johtuvat minkä tahansa yksittäisen yhdisteen tai ryhmän läsnäolosta, joka imeytyy ensisijaisen absorboivan molekyylin välittömässä läheisyydessä. Toisaalta fysikaaliset häiriöt johtuvat yleensä näytteessä olevista suspendoituneista kiinteistä epäpuhtauksista, jotka voivat johtaa sirontaan.

Fyysiset häiriöt

Valon sironta johtuu suspendoituneiden epäpuhtauksien läsnäolosta absorboivassa liuoksessa. Se johtaa taustaabsorbanssiin, joka vähentää kiinnostavan analyytin absorbanssia. Näytteiden suodatus tai sentrifugointi ennen absorbanssimittausten tekemistä näyttää olevan ilmeinen ratkaisu, mutta tämä ei ole käytännöllinen lähestymistapa, kun saatavilla on vain μl:n kokoisia näytteitä. Sironnan aiheuttamaa absorbanssihäviötä voidaan vähentää pienentämällä näytteen ja anturin välistä rakoa.

Kemialliset häiriöt

Kemialliset häiriöt voivat johtua siitä, että valoa absorboivassa liuoksessa on yksi tai useampi absorboiva kokonaisuus.

Isoabsorbanssin mittaukset

Jos läsnä on häiritsevää yhdistettä, jolla on tunnetut absorbanssiominaisuudet, sen häiriö pääanalyytin kanssa voidaan eliminoida valitsemalla aallonpituus, jossa häiritsevä yhdiste osoittaa jonkin verran absorbanssia, kuten se tekee analyyttisellä aallonpituudella. Kun absorbanssi vähennetään tällä aallonpituudella absorbanssista analyyttisen aallonpituuden jäännösabsorbanssi on analyytin oikea absorbanssi. Tämä lähestymistapa on käytännöllinen, jos vain yksi interferenssi on läsnä ja jos sen maksimiabsorbanssin aallonpituus on kaukana analyytin absorboivasta aallonpituudesta.

Monikomponenttiset häiriöt

Monikomponenttianalyysiä voidaan soveltaa, kun läsnä on useampi kuin yksi häiriötekijä ja spektri on huomattavan päällekkäinen pääanalyytin spektrien kanssa. Puhtaan interferenssin absorbanssi vähennetään mitatusta absorbanssista, jotta saadaan halutun analyytin todellinen absorbanssi,

Kolmen pisteen korjaus

Tässä menetelmässä valitaan kaksi aallonpituutta lähellä analyyttistä aallonpituutta, mutta sen kummaltakin puolelta. Taustan häiriö voidaan arvioida tarkasti käyttämällä lineaarista interpolaatiota. Menetelmä soveltuu erityisesti monimutkaisista näytematriiseista saataville epälineaarisille taustaabsorbansseille.

Johdannaisspektroskopia

Ylivoimaisesti kätevin lähestymistapa taustan ja kohinan korjaukseen on johdannaisspektroskopia. Ensimmäisen derivaatan inflexiopiste vastaa maksimiabsorbanssin aallonpituutta ja toinen derivaatta näkyy negatiivisen muotoisen piikin kärjenä. Tämä auttaa erottamaan toisistaan hyvin lähellä olevat tai päällekkäiset absorbanssihuiput. Ensimmäinen derivaatta eliminoi edelleen mahdolliset perusviivasiirtymät, ja tämä auttaa parantamaan kvantitatiivisen analyysin tarkkuutta. Perusviivasiirtymän lisäksi derivaattaspektroskopia auttaa myös voittamaan muiden tunnistamattomien häiritsevien yhdisteiden hajoamisen vaikutukset.

Lähde