Πολλά εργαστήρια υπόκεινται σε κανονιστικές απαιτήσεις που π.χ. ορίζονται από Συστήματα Διαχείρισης Ποιότητας. Αυτά τα εργαστήρια είναι επομένως υποχρεωμένα να δοκιμάζουν τον εξοπλισμό εργασίας και τα όργανα ανάλυσης, συμπεριλαμβανομένων των φωτομέτρων (φασματοφωτομέτρων), σε τακτική βάση. Τι γίνεται αν τέτοιοι κανονισμοί δεν ισχύουν για το εργαστήριό σας; Σε αυτήν την περίπτωση, ο έλεγχος δεν είναι απολύτως απαραίτητος, καθώς δεν είναι υποχρεωτικός – αλλά αυτό σημαίνει ότι δεν είναι σημαντικό;

Οποιοσδήποτε θα σας πει ότι, έχοντας μια επιλογή, θα προτιμούσε να αποφύγει την περιττή προσπάθεια, χρόνο και κόστος όταν πρόκειται για εργαστηριακά πειράματα. Μόνο μια ομαλή, χωρίς σφάλματα απόδοση ολόκληρου του πειράματος, από την αρχή μέχρι το τέλος, θα εγγυηθεί ακριβή και αναπαραγώγιμα αποτελέσματα. Αυτή η διαδικασία περιλαμβάνει ανάλυση, καθώς η ποιότητα των δεδομένων που λαμβάνονται για οποιοδήποτε δείγμα εξαρτάται άμεσα από την ποιότητα της ίδιας της μέτρησης.

Όσον αφορά μια τυπική εργαστηριακή εφαρμογή όπως, για παράδειγμα, η φωτομετρική ποσοτικοποίηση νουκλεϊκών οξέων, αυτή η αρχή θα συνεπαγόταν ότι, εκτός από τη διαδικασία καθαρισμού, η διαδικασία της φωτομετρικής μέτρησης πρέπει να αμφισβητείται και να ελέγχεται τακτικά. Τα σφάλματα μπορεί να προκύψουν από λανθασμένο χειρισμό ή η αιτία μπορεί να είναι τεχνικής φύσης. Χρησιμοποιώντας μια κατάλληλη προσέγγιση αντιμετώπισης προβλημάτων με ανάλυση σφαλμάτων «βήμα προς βήμα», τα σφάλματα εφαρμογής εντοπίζονται με σχετική ευκολία [1, 2]. Αντίθετα, πολλά τεχνολογικά λάθη μπορούν να αποκαλυφθούν μόνο με τη βοήθεια συγκριτικών μετρήσεων και υλικών αναφοράς [3, 4].

Πώς προκύπτουν τεχνολογικά λάθη; Η χρήση φωτομέτρων για παρατεταμένο χρονικό διάστημα μπορεί να οδηγήσει σε σημάδια φθοράς που οφείλονται σε μηχανική καταπόνηση. Επιπλέον, διαφορετικοί περιβαλλοντικοί παράγοντες (π.χ. θερμοκρασία, υγρασία, σκόνη) μπορεί να επηρεάσουν την απόδοση. Στη συνέχεια, υπάρχει πάντα ο κίνδυνος ζημιάς ή μόλυνσης από τη χρήση ή τη μεταφορά. Δεδομένου ότι η φωτομετρία είναι μια ευαίσθητη τεχνολογία μέτρησης, ενδέχεται να προκύψουν εσφαλμένα αποτελέσματα. Προκειμένου να εντοπιστούν αξιόπιστα σφάλματα τέτοιας φύσης, είναι σημαντικό να ελέγχονται τα φωτόμετρα σε τακτική βάση.

Ο έλεγχος για ορατές ζημιές και ρύπους, ειδικά μέσα στον άξονα της κυβέτας, αποτελεί το πρώτο βήμα. Εάν το όργανο είναι εξοπλισμένο με ενσωματωμένη λειτουργία αυτοδιαγνωστικού ελέγχου, ορισμένες βασικές λειτουργίες μπορούν επίσης να ελέγχονται σε τακτά χρονικά διαστήματα ή ανάλογα με τις ανάγκες (εικόνα 1α).

Προκειμένου να ληφθούν λεπτομερείς πληροφορίες σχετικά με την ακρίβεια και την ακρίβεια των μετρούμενων τιμών, η φωτομετρική δοκιμή του (φασματο-)φωτόμετρου είναι απαραίτητη. Για το σκοπό αυτό, οι μετρήσεις πραγματοποιούνται με χρήση πιστοποιημένων, ανιχνεύσιμων υλικών αναφοράς (εικόνα 1β). Αυτά συνήθως περιλαμβάνουν σετ φίλτρων με καθορισμένες ιδιότητες που είναι ικανά να καθορίσουν τα μήκη κύματος και τη φωτομετρική ακρίβεια ενός οργάνου. Στη συνέχεια, οι τιμές που λαμβάνονται με την εφαρμογή των φίλτρων συγκρίνονται με τις ονομαστικές τιμές των προτύπων αναφοράς και αυτή η σύγκριση επιτρέπει στο χρήστη να προσδιορίσει εάν το όργανο λειτουργεί σύμφωνα με τις τεχνικές προδιαγραφές. Θα πρέπει να σημειωθεί ότι τα ίδια τα υλικά αναφοράς πρέπει να ελέγχονται και να πιστοποιούνται σε τακτική βάση.

Η εις βάθος επιθεώρηση ενός φωτομέτρου μπορεί να πραγματοποιηθεί μόνο από εξειδικευμένη εταιρεία σέρβις. Αυτή η υπηρεσία περιλαμβάνει προσαρμογές, επισκευή και πιστοποίηση, εάν απαιτείται.

Εικόνα 1: Δύο μέθοδοι για την επιθεώρηση ενός Eppendorf BioSpectrometer®
α) Αποτέλεσμα αυτοδιαγνωστικού ελέγχου της κινητικής του Eppendorf BioSpectrometer
β) Αποτέλεσμα της δοκιμής φωτομετρικής ακρίβειας ενός βιοφασματόμετρου Eppendorf χρησιμοποιώντας το σχετικό σετ φίλτρων αναφοράς

Η τακτική παρακολούθηση των φωτομέτρων μπορεί να διασφαλίσει ότι οι προδιαγραφές τους συνεχίζουν να τηρούνται, ακόμη και μετά από μακρά λειτουργία. Οι κατάλληλες μέθοδοι επαλήθευσης θα εντοπίσουν και θα εξαλείψουν τις πηγές σφαλμάτων, διασφαλίζοντας έτσι την ποιότητα των αποτελεσμάτων της ανάλυσης.