De nombreux laboratoires sont soumis à des exigences réglementaires qui, par exemple, sont prescrites par les systèmes de gestion de la qualité. Ces laboratoires sont donc tenus de tester régulièrement les équipements de travail et les instruments d’analyse, y compris les (spectro-)photomètres. Que se passe-t-il si ces réglementations ne s’appliquent pas à votre laboratoire ? Dans ce cas, le test n’est pas absolument nécessaire, car il n’est pas obligatoire – mais cela signifie-t-il qu’il n’est pas important ?

N’importe qui vous dira que, s’ils avaient le choix, ils préféreraient éviter des efforts, du temps et des coûts inutiles lorsqu’il s’agit d’expériences en laboratoire. Seule une exécution fluide et sans erreur de l’ensemble de l’expérience, du début à la fin, garantira des résultats précis et reproductibles. Ce processus comprend l’analyse, car la qualité des données obtenues pour tout échantillon dépend directement de la qualité de la mesure elle-même.

Par rapport à une application de laboratoire standard telle que, par exemple, la quantification photométrique d’acides nucléiques, ce principe impliquerait qu’en plus de la procédure de purification, le processus de mesure photométrique doit être contesté et testé régulièrement. Des erreurs peuvent résulter d’une manipulation incorrecte ou la cause peut être de nature technique. En utilisant une approche de dépannage appropriée avec une analyse d’erreur « étape par étape », les erreurs d’application sont détectées avec une relative facilité [1, 2]. En revanche, de nombreuses erreurs technologiques ne peuvent être découvertes qu’à l’aide de mesures comparatives et de matériaux de référence [3, 4].

Comment les erreurs technologiques surviennent-elles ? L’utilisation prolongée de photomètres peut entraîner des signes d’usure dus à des contraintes mécaniques. De plus, différents facteurs environnementaux (par ex. température, humidité, poussière) peuvent avoir un impact sur les performances. Ensuite, il y a toujours un risque de détérioration ou de contamination par l’utilisation ou le transport. La photométrie étant une technologie de mesure sensible, des résultats erronés peuvent donc en résulter. Afin d’identifier de manière fiable les erreurs de cette nature, il est crucial que les photomètres soient testés régulièrement.

La vérification des dommages visibles et de la saleté, en particulier à l’intérieur du puits de la cuvette, constitue la première étape. Si l’instrument est équipé d’une fonction d’autotest intégrée, certaines fonctions de base peuvent également être testées à intervalles réguliers ou selon les besoins (figure 1a).

Afin d’obtenir des informations détaillées sur l’exactitude et la précision des valeurs mesurées, un test photométrique du (spectro-)photomètre est essentiel. Pour cela, des mesures sont réalisées à l’aide de matériaux de référence certifiés et traçables (figure 1b). Ceux-ci comprennent généralement des ensembles de filtres aux propriétés définies capables d’établir les longueurs d’onde et la précision photométrique d’un instrument. Les valeurs obtenues en appliquant les filtres sont ensuite comparées aux valeurs nominales des normes de référence, et cette comparaison permet à l’utilisateur de déterminer si l’instrument fonctionne dans les spécifications techniques. Il convient de noter que les matériaux de référence eux-mêmes doivent être testés et certifiés régulièrement.

L’inspection approfondie d’un photomètre ne peut être effectuée que par une entreprise de service qualifiée. Ce service comprend les ajustements, les réparations et la certification si nécessaire.

Figure 1 : Deux méthodes pour inspecter un Eppendorf BioSpectrometer®
a) Résultat d’un auto-test de l’instrument Eppendorf BioSpectrometer kinetic
b) Résultat du test de précision photométrique d’un Eppendorf BioSpectrometer utilisant le jeu de filtres de référence associé

Une surveillance régulière des photomètres peut garantir que leurs spécifications continuent d’être respectées, même après une longue utilisation. Des méthodes de vérification appropriées détecteront et élimineront les sources d’erreur, préservant ainsi la qualité des résultats d’analyse.