Idealmente, o espectro de absorvância de uma solução que contenha uma única substância a analisar deve ser uma única banda de absorção no comprimento de onda da absorvância máxima. No entanto, em amostras reais, o espectro é influenciado pela presença de outras espécies que interferem. Tais interferências podem ser facilmente eliminadas através da adoção de diferentes abordagens abrangidas pelo artigo.

As interferências na espectroscopia visível uv-resulta de vários fatores que podem ser tanto físicos como químicos na natureza. As interferências químicas resultam da presença de qualquer único ou grupo de compostos que absorvem nas proximidades da molécula absorvente primária. Por outro lado, as interferências físicas decorrem geralmente de impurezas sólidas suspensas na amostra que podem levar à dispersão.

Interferências Físicas

A dispersão da luz é causada pela presença de impurezas suspensas na solução absorvente. Resulta numa absorvância de fundo que reduz a absorvância da substância analítica do interesse. A filtragem ou centrifugação de amostras antes de fazer medições de absorvância parece ser a solução óbvia, mas esta não é uma abordagem prática quando apenas estão disponíveis amostras de tamanho μl. A perda de absorvância devido à dispersão pode ser reduzida reduzindo o espaço entre a amostra e o detetor.

Interferências Químicas

As interferências químicas podem resultar da presença de um único ou de um grupo de entidades absorventes na solução de absorção de luz.

Medições de Isoabsorbance

No caso de um composto de interferência estar presente com características conhecidas de absorvância, a sua interferência com o principal alídeto pode ser eliminada selecionando um comprimento de onda onde o composto de interferência mostra alguma absorvância como faz no comprimento de onda analítico. Ao subtrair a absorvância a este comprimento de onda da absorvância no comprimento de onda analítico, a absorvância residual é a absorvância correta da substância a analisar. Esta abordagem é prática se apenas um único interferidor estiver presente e se o seu comprimento máximo de onda de absorvância estiver longe do comprimento de onda absorvente da substância.

Interferência Multicomponente

A análise multicomponente é aplicável quando mais de um interferindo está presente e há uma sobreposição espectral considerável com o espectro da substância principal. A absorvância do interferor puro é subtraída da absorvância medida para chegar à verdadeira absorvância da substância analítica do interesse,

Correção de três pontos

Neste método, selecionam-se dois comprimentos de onda próximos do comprimento de onda analítico, mas em ambos os lados. A interferência de fundo pode ser estimada com precisão usando a interpolação linear. O método é aplicável especialmente para absorvâncias de fundo não lineares resultantes de matrizes de amostras complexas.

Espectroscopia Derivada

De longe, a abordagem mais conveniente para a correção de antecedentes e ruído é a espectroscopia derivada. O ponto de inflexão do primeiro derivado corresponde ao comprimento de onda da absorvância máxima e o segundo derivado aparece como a ponta do pico de forma negativa. Isto ajuda a diferenciar entre picos de absorção muito espaçados ou sobrepostos. O primeiro derivado elimina ainda mais as mudanças de base, caso existam, o que ajuda a melhorar a precisão da análise quantitativa. Além da mudança de base, a espectroscopia derivada também ajuda a superar os efeitos da dispersão de outros compostos não identificados.

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