Cuvettes

Dependendo do instrumento, os espectrofotómetros efetuam medições numa das três alturas de luz ótica do feixe (a distância do fundo da cuvette, também conhecido como dimensão Z ou altura da luz): 8,5, 15 ou 20 mm. A maioria dos espectrofotómetros aceita macro cuvettes uma vez que têm uma parede reta. As micro cuvetas, por outro lado, têm a mesma pegada exterior que os cuvetes padrão, mas os seus interiores são geralmente cónicos para limitar a quantidade de material de amostra necessária. A cuvette padrão, por outro lado, destina-se a medir através da amostra a uma determinada altura luminosa na câmara. É fundamental verificar duas vezes se a dimensão cuvette Z que usa para medir a sua amostra é compatível com a altura luminosa do seu instrumento. Considere as seguintes características-chave das cuvettes:

1. Ao medir materiais com baixas concentrações, tais como RNA, ADN de um só encado e oligonucleótidos, você precisará de um comprimento de caminho longo o suficiente para manter os valores dentro da gama linear de medição do instrumento. Embora algumas cuvetas agora no mercado permitam um comprimento de caminho alternativo, o tamanho padrão é de 10 mm. Alguns cuvetes de comprimento de dois caminhos podem ser transformados em 90 graus para uma leitura em outro comprimento de caminho.
2. Recomenda-se a utilização de uma cuvette de plástico estéril e descartável se quiser recuperar a amostra após uma medição. Embora os cuvetes a granel estejam disponíveis, algumas aplicações podem necessitar de cuvetes estéreis estéreis e embrulhados individualmente que não sejam certificados sem proteínas ou sem nuclease.
3. A absorvância de uma amostra num comprimento de onda de 600 nm, geralmente referida como “OD600”, é usada para estimar a concentração de uma cultura bacteriana. A maior capacidade de amostra de um macro cuvette permite que amostras heterogéneas como estas produzam uma leitura mais precisa.