{"id":68072,"date":"2022-02-21T10:35:12","date_gmt":"2022-02-21T02:35:12","guid":{"rendered":"https:\/\/qvarz.com\/spektrofotometria\/"},"modified":"2022-02-21T10:38:30","modified_gmt":"2022-02-21T02:38:30","slug":"spektrofotometria","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/spektrofotometria\/","title":{"rendered":"Spektrofotometria"},"content":{"rendered":"\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Spektrofotometria to metoda pomiaru stopnia poch\u0142aniania \u015bwiat\u0142a przez substancj\u0119 chemiczn\u0105 poprzez pomiar nat\u0119\u017cenia \u015bwiat\u0142a podczas przechodzenia wi\u0105zki \u015bwiat\u0142a przez roztw\u00f3r pr\u00f3bki. Podstawow\u0105 zasad\u0105 jest to, \u017ce ka\u017cdy zwi\u0105zek poch\u0142ania lub przepuszcza \u015bwiat\u0142o w okre\u015blonym zakresie d\u0142ugo\u015bci fal. Pomiar ten mo\u017cna r\u00f3wnie\u017c wykorzysta\u0107 do pomiaru ilo\u015bci znanej substancji chemicznej. Spektrofotometria jest jedn\u0105 z najbardziej u\u017cytecznych metod analizy ilo\u015bciowej w r\u00f3\u017cnych dziedzinach, takich jak chemia, fizyka, biochemia, in\u017cynieria materia\u0142owa i chemiczna oraz zastosowania kliniczne.<\/p>\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Wst\u0119p<\/h2>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Ka\u017cdy zwi\u0105zek chemiczny poch\u0142ania, przepuszcza lub odbija \u015bwiat\u0142o (promieniowanie elektromagnetyczne) w okre\u015blonym zakresie d\u0142ugo\u015bci fal. Spektrofotometria to pomiar tego, ile substancja chemiczna poch\u0142ania lub przenosi. Spektrofotometria jest szeroko stosowana do analizy ilo\u015bciowej w r\u00f3\u017cnych dziedzinach (np. chemia, fizyka, biologia, biochemia, in\u017cynieria materia\u0142owa i chemiczna, zastosowania kliniczne, zastosowania przemys\u0142owe itp.). Ka\u017cda aplikacja, kt\u00f3ra zajmuje si\u0119 substancjami chemicznymi lub materia\u0142ami, mo\u017ce wykorzystywa\u0107 t\u0119 technik\u0119. Na przyk\u0142ad w biochemii s\u0142u\u017cy do okre\u015blania reakcji katalizowanych enzymami. W zastosowaniach klinicznych s\u0142u\u017cy do badania krwi lub tkanek w celu diagnozy klinicznej. Istnieje r\u00f3wnie\u017c kilka odmian spektrofotometrii, takich jak spektrofotometria absorpcji atomowej i spektrofotometria emisji atomowej.<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Spektrofotometr to przyrz\u0105d, kt\u00f3ry mierzy ilo\u015b\u0107 foton\u00f3w (nat\u0119\u017cenie \u015bwiat\u0142a) poch\u0142oni\u0119tego po przej\u015bciu przez roztw\u00f3r pr\u00f3bki. Za pomoc\u0105 spektrofotometru mo\u017cna r\u00f3wnie\u017c okre\u015bli\u0107 ilo\u015b\u0107 znanej substancji chemicznej (st\u0119\u017cenia) poprzez pomiar nat\u0119\u017cenia wykrytego \u015bwiat\u0142a. W zale\u017cno\u015bci od zakresu d\u0142ugo\u015bci fali \u017ar\u00f3d\u0142a \u015bwiat\u0142a mo\u017cna je podzieli\u0107 na dwa r\u00f3\u017cne typy:<\/p>\n\n<ul class=\"wp-block-list\"><li><strong>Spektrofotometr UV-widzialny<\/strong> : wykorzystuje \u015bwiat\u0142o w zakresie ultrafioletowym (185 &#8211; 400 nm) i widzialnym (400 &#8211; 700 nm) widma promieniowania elektromagnetycznego.<\/li><li><strong>Spektrofotometr IR<\/strong> : wykorzystuje \u015bwiat\u0142o w zakresie podczerwieni (700 &#8211; 15000 nm) widma promieniowania elektromagnetycznego.<\/li><\/ul>\n<p class=\"wp-block-paragraph\">W spektrofotometrii widzialnej absorpcj\u0119 lub transmisj\u0119 danej substancji mo\u017cna okre\u015bli\u0107 na podstawie obserwowanej barwy. Na przyk\u0142ad pr\u00f3bka roztworu, kt\u00f3ra poch\u0142ania \u015bwiat\u0142o we wszystkich widzialnych zakresach (tj. nie przepuszcza \u017cadnej widzialnej d\u0142ugo\u015bci fali) teoretycznie wydaje si\u0119 czarna. Z drugiej strony, je\u015bli wszystkie widzialne d\u0142ugo\u015bci fal s\u0105 transmitowane (tj. nic nie absorbuj\u0105), pr\u00f3bka roztworu wydaje si\u0119 bia\u0142a. Je\u015bli pr\u00f3bka roztworu absorbuje \u015bwiat\u0142o czerwone (~700 nm), wydaje si\u0119 zielone, poniewa\u017c zielony jest kolorem dope\u0142niaj\u0105cym czerwieni. W praktyce spektrofotometry widzialne wykorzystuj\u0105 pryzmat do zaw\u0119\u017cenia pewnego zakresu d\u0142ugo\u015bci fali (w celu odfiltrowania innych d\u0142ugo\u015bci fal), tak aby wi\u0105zka \u015bwiat\u0142a przechodzi\u0142a przez pr\u00f3bk\u0119 roztworu.<\/p>\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Urz\u0105dzenia i mechanizm<\/h2>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Rysunek 1 ilustruje podstawow\u0105 struktur\u0119 spektrofotometr\u00f3w. Sk\u0142ada si\u0119 ze \u017ar\u00f3d\u0142a \u015bwiat\u0142a, kolimatora, monochromatora, selektora d\u0142ugo\u015bci fali, kuwety na roztw\u00f3r pr\u00f3bki, detektora fotoelektrycznego oraz wy\u015bwietlacza cyfrowego lub miernika. Szczeg\u00f3\u0142owy mechanizm opisano poni\u017cej. Rysunek 2 przedstawia przyk\u0142adowy spektrofotometr (model: Spectronic 20D).<\/p>\n\n<div class=\"wp-block-image\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><a href=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-1.png\"><img fetchpriority=\"high\" decoding=\"async\" width=\"939\" height=\"316\" src=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-1.png\" alt=\"\" class=\"wp-image-67992\" title=\"\" srcset=\"https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-1.png 939w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-1-90x30.png 90w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-1-600x202.png 600w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-1-64x22.png 64w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-1-300x101.png 300w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-1-768x258.png 768w\" sizes=\"(max-width: 939px) 100vw, 939px\" \/><\/a><figcaption>Rysunek 1: Podstawowa struktura spektrofotometr\u00f3w (CC BY-4.0; Heesung Shim przez LibreTexts)<\/figcaption><\/figure><\/div>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Na og\u00f3\u0142 spektrofotometr sk\u0142ada si\u0119 z dw\u00f3ch urz\u0105dze\u0144; spektrometr i fotometr. Spektrometr to urz\u0105dzenie, kt\u00f3re wytwarza, zazwyczaj rozprasza i mierzy \u015bwiat\u0142o. Fotometr wskazuje detektor fotoelektryczny, kt\u00f3ry mierzy nat\u0119\u017cenie \u015bwiat\u0142a.<\/p>\n\n<ul class=\"wp-block-list\"><li><strong>Spektrometr<\/strong> : wytwarza \u017c\u0105dany zakres d\u0142ugo\u015bci fali \u015bwiat\u0142a. Najpierw kolimator (soczewka) przesy\u0142a prost\u0105 wi\u0105zk\u0119 \u015bwiat\u0142a (fotony), kt\u00f3ra przechodzi przez monochromator (pryzmat), aby podzieli\u0107 j\u0105 na kilka sk\u0142adowych d\u0142ugo\u015bci fal (widmo). Nast\u0119pnie selektor d\u0142ugo\u015bci fali (szczelina) przesy\u0142a tylko \u017c\u0105dane d\u0142ugo\u015bci fal, jak pokazano na rysunku 1.<\/li><li><strong>Fotometr<\/strong> : Po przej\u015bciu \u017c\u0105danego zakresu d\u0142ugo\u015bci fali \u015bwiat\u0142a przez roztw\u00f3r pr\u00f3bki w kuwecie fotometr wykrywa ilo\u015b\u0107 foton\u00f3w, kt\u00f3re s\u0105 poch\u0142aniane, a nast\u0119pnie wysy\u0142a sygna\u0142 do galwanometru lub wy\u015bwietlacza cyfrowego, jak pokazano na rysunku 1.<\/li><\/ul>\n<div class=\"wp-block-image\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><a href=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-2.png\"><img decoding=\"async\" width=\"349\" height=\"261\" src=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-2.png\" alt=\"\" class=\"wp-image-68006\" title=\"\" srcset=\"https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-2.png 349w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-2-72x54.png 72w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-2-64x48.png 64w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-2-300x224.png 300w\" sizes=\"(max-width: 349px) 100vw, 349px\" \/><\/a><figcaption>Rysunek 2: Spektrofotometr o pojedynczej d\u0142ugo\u015bci fali<\/figcaption><\/figure><\/div>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Potrzebujesz spektrometru, aby wytworzy\u0107 r\u00f3\u017cne d\u0142ugo\u015bci fal, poniewa\u017c r\u00f3\u017cne zwi\u0105zki najlepiej absorbuj\u0105 przy r\u00f3\u017cnych d\u0142ugo\u015bciach fal. Na przyk\u0142ad p-nitrofenol (posta\u0107 kwasowa) ma maksymaln\u0105 absorbancj\u0119 przy oko\u0142o 320 nm, a p-nitrofenolan (posta\u0107 podstawowa) najlepiej absorbuje przy 400 nm, jak pokazano na rysunku 3.<\/p>\n\n<div class=\"wp-block-image\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><a href=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-3.png\"><img decoding=\"async\" width=\"775\" height=\"339\" src=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-3.png\" alt=\"\" class=\"wp-image-68020\" title=\"\" srcset=\"https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-3.png 775w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-3-90x39.png 90w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-3-600x262.png 600w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-3-64x28.png 64w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-3-300x131.png 300w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-3-768x336.png 768w\" sizes=\"(max-width: 775px) 100vw, 775px\" \/><\/a><figcaption>Rysunek 3: Absorpcja dw\u00f3ch r\u00f3\u017cnych zwi\u0105zk\u00f3w<\/figcaption><\/figure><\/div>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Patrz\u0105c na wykres, kt\u00f3ry mierzy absorbancj\u0119 i d\u0142ugo\u015b\u0107 fali, mo\u017cna r\u00f3wnie\u017c zaobserwowa\u0107 punkt izobestyczny. <strong>Punkt izobestyczny<\/strong> to d\u0142ugo\u015b\u0107 fali, przy kt\u00f3rej absorbancja dw\u00f3ch lub wi\u0119cej gatunk\u00f3w jest taka sama. Pojawienie si\u0119 w reakcji punktu izobestycznego pokazuje, \u017ce p\u00f3\u0142produkt NIE jest wymagany do wytworzenia produktu z substratu. Rysunek 4 przedstawia przyk\u0142ad punktu izobestycznego.<\/p>\n\n<figure class=\"wp-block-image size-large\"><a href=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-4.png\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"811\" height=\"361\" src=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-4.png\" alt=\"\" class=\"wp-image-68034\" title=\"\" srcset=\"https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-4.png 811w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-4-90x40.png 90w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-4-600x267.png 600w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-4-64x28.png 64w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-4-300x134.png 300w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-4-768x342.png 768w\" sizes=\"(max-width: 811px) 100vw, 811px\" \/><\/a><figcaption>Rysunek 4: Przyk\u0142ad punktu izobestycznego (CC BY-4.0; Heesung Shim przez LibreTexts)<\/figcaption><\/figure>\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Wracaj\u0105c do rysunku 1 (i rysunku 5), ilo\u015b\u0107 foton\u00f3w przechodz\u0105cych przez kuwet\u0119 do detektora zale\u017cy od d\u0142ugo\u015bci kuwety i st\u0119\u017cenia pr\u00f3bki. Znaj\u0105c nat\u0119\u017cenie \u015bwiat\u0142a po przej\u015bciu przez kuwet\u0119, mo\u017cna odnie\u015b\u0107 je do transmitancji (T). Transmitancja to u\u0142amek \u015bwiat\u0142a przechodz\u0105cego przez pr\u00f3bk\u0119. Mo\u017cna to obliczy\u0107 za pomoc\u0105 r\u00f3wnania:<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(Transmitancja (T) = \\dfrac{I_t}{I_o} \\)<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Gdzie I <sub>t<\/sub> to nat\u0119\u017cenie \u015bwiat\u0142a po przej\u015bciu wi\u0105zki \u015bwiat\u0142a przez kuwet\u0119, a I <sub>o<\/sub> to nat\u0119\u017cenie \u015bwiat\u0142a przed przej\u015bciem wi\u0105zki \u015bwiat\u0142a przez kuwet\u0119. Przepuszczalno\u015b\u0107 zwi\u0105zana jest z absorpcj\u0105 wyra\u017ceniem:<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(Absorbancja (A) = &#8211; log(T) = &#8211; log(\\dfrac{I_t}{I_o} )\\)<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Gdzie absorbancja oznacza ilo\u015b\u0107 poch\u0142oni\u0119tych foton\u00f3w. Maj\u0105c wielko\u015b\u0107 absorbancji znan\u0105 z powy\u017cszego r\u00f3wnania, mo\u017cna wyznaczy\u0107 nieznane st\u0119\u017cenie pr\u00f3bki za pomoc\u0105 prawa Beera-Lamberta. Rysunek 5 ilustruje przepuszczanie \u015bwiat\u0142a przez pr\u00f3bk\u0119. D\u0142ugo\u015b\u0107 \\(l\\) jest u\u017cywana dla opisanego poni\u017cej prawa Beera-Lamberta.<\/p>\n\n<div class=\"wp-block-image\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><a href=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spektrometria-5.png\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"487\" height=\"255\" src=\"\/\/i0.wp.com\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-5.png\" alt=\"\" class=\"wp-image-68048\" title=\"\" srcset=\"https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-5.png 487w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-5-90x47.png 90w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-5-64x34.png 64w, https:\/\/qvarz.com\/wp-content\/uploads\/2022\/02\/spectrometry-5-300x157.png 300w\" sizes=\"(max-width: 487px) 100vw, 487px\" \/><\/a><figcaption>Rysunek 5: Transmitancja (CC BY-4.0; Heesung Shim przez LibreTexts)<\/figcaption><\/figure><\/div>\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Prawo Beer-Lambert<\/h2>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><a href=\"https:\/\/chem.libretexts.org\/Bookshelves\/Physical_and_Theoretical_Chemistry_Textbook_Maps\/Supplemental_Modules_(Physical_and_Theoretical_Chemistry)\/Spectroscopy\/Electronic_Spectroscopy\/Electronic_Spectroscopy_Basics\/The_Beer-Lambert_Law\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">Prawo Beera-Lamberta<\/a> (znane r\u00f3wnie\u017c jako Prawo Beera) stwierdza, \u017ce istnieje liniowa zale\u017cno\u015b\u0107 mi\u0119dzy absorbancj\u0105 a st\u0119\u017ceniem pr\u00f3bki. Z tego powodu prawo Beera mo\u017ce by\u0107 stosowane <em>tylko<\/em> wtedy, gdy istnieje zale\u017cno\u015b\u0107 liniowa. Prawo piwa jest zapisane jako:<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(A = \\epsilon{lc} \\)<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">gdzie<\/p>\n\n<ul class=\"wp-block-list\"><li>\\(A\\) to miara absorbancji (bez jednostek),<\/li><li>\\(\\epsilon\\) to molowy wsp\u00f3\u0142czynnik ekstynkcji lub molowa absorpcja (lub wsp\u00f3\u0142czynnik absorpcji),<\/li><li>\\(l\\) to d\u0142ugo\u015b\u0107 \u015bcie\u017cki, a<\/li><li>\\(c\\) to st\u0119\u017cenie.<\/li><\/ul>\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Molowy wsp\u00f3\u0142czynnik ekstynkcji jest podawany jako sta\u0142a i zmienia si\u0119 dla ka\u017cdej cz\u0105steczki. Poniewa\u017c absorbancja nie zawiera \u017cadnych jednostek, jednostki \\(\\epsilon\\) musz\u0105 skre\u015bla\u0107 jednostki d\u0142ugo\u015bci i st\u0119\u017cenia. W rezultacie \\(\\epsilon\\) ma jednostki: L\u00b7mol <sup>-1<\/sup> \u00b7cm <sup>-1<\/sup> . D\u0142ugo\u015b\u0107 \u015bcie\u017cki mierzona jest w centymetrach. Poniewa\u017c standardowy spektrometr u\u017cywa kuwety o szeroko\u015bci 1 cm, przyjmuje si\u0119, \u017ce \\(l\\) jest r\u00f3wne 1 cm. Poniewa\u017c absorpcja, \\(\\epsilon\\) i d\u0142ugo\u015b\u0107 drogi s\u0105 znane, mo\u017cemy obliczy\u0107 st\u0119\u017cenie \\(c\\) pr\u00f3bki.<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Przyk\u0142ad 1<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><a href=\"https:\/\/chem.libretexts.org\/Bookshelves\/Biological_Chemistry\/Supplemental_Modules_(Biological_Chemistry)\/Nucleic_Acids\/Nucleic_Acids\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">Guanozyna<\/a> ma maksymaln\u0105 absorbancj\u0119 275 nm. \\(\\epsilon_{275} = 8400 M^{-1} cm^{-1} \\) a d\u0142ugo\u015b\u0107 \u015bcie\u017cki wynosi 1 cm. U\u017cywaj\u0105c spektrofotometru, mo\u017cna znale\u017a\u0107 \\(A_{275} = 0,70\\). Jakie jest st\u0119\u017cenie guanozyny?<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Rozwi\u0105zanie<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Aby rozwi\u0105za\u0107 ten problem, musisz skorzysta\u0107 z Prawa Beera.<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\[A lc     \/&gt;<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">0,70 = (8400 M <sup>-1<\/sup> cm <sup>-1<\/sup> )(1 cm)(\\(c\\))<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Nast\u0119pnie podziel obie strony przez [(8400 M <sup>-1<\/sup> cm <sup>-1<\/sup> )(1 cm)]<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(c\\) = 8,33&#215;10 <sup>-5<\/sup> mol\/L<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Przyk\u0142ad 2<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">W roztworze znajduje si\u0119 substancja (4 g\/litr). D\u0142ugo\u015b\u0107 kuwety wynosi 2 cm i przepuszczane jest tylko 50% okre\u015blonej wi\u0105zki \u015bwiat\u0142a. Jaki jest wsp\u00f3\u0142czynnik absorpcji?<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Rozwi\u0105zanie<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Korzystaj\u0105c z prawa Beera-Lamberta mo\u017cemy obliczy\u0107 wsp\u00f3\u0142czynnik absorpcji. Zatem,<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(- \\log \\left(\\dfrac{I_t}{I_o} \\right) = &#8211; \\log(\\dfrac{0.5}{1.0}) = A ={8} \\epsilon\\)<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Wtedy uzyskujemy to<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(\\epsilon\\) = 0,0376<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Przyk\u0142ad 3<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">W przyk\u0142adzie 2 powy\u017cej, ile \u015bwiat\u0142a jest transmitowane przy 8 g\/litr?<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Rozwi\u0105zanie<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Poniewa\u017c znamy \\(\\epsilon\\), mo\u017cemy obliczy\u0107 transmisj\u0119 za pomoc\u0105 prawa Beera-Lamberta. Zatem,<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(\\log(1) &#8211; \\log(I_t) = 0 &#8211; \\log(I_t)\\) = 0,0376 x 8 x 2 = 0,6016<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(\\log(I_t)\\) = -0,6016<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Dlatego \\(I_t\\) = 0,2503 = 25%<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Przyk\u0142ad 4<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">W przyk\u0142adzie 2 powy\u017cej, jaki jest molowy wsp\u00f3\u0142czynnik absorpcji, je\u015bli masa cz\u0105steczkowa wynosi 100?<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Rozwi\u0105zanie<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Mo\u017cna to po prostu uzyska\u0107, mno\u017c\u0105c wsp\u00f3\u0142czynnik absorpcji przez mas\u0119 cz\u0105steczkow\u0105. Zatem,<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\(\\epsilon\\) = 0,0376 x 100 = 3,76 L\u00b7mol <sup>&#8211;<\/sup><sup>1<\/sup> \u00b7cm <sup>&#8211;<\/sup><sup>1<\/sup><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Przyk\u0142ad 5<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Wsp\u00f3\u0142czynnik absorpcji kompleksu glikogen-jod wynosi 0,20 przy \u015bwietle 450 nm. Jakie jest st\u0119\u017cenie, gdy transmisja wynosi 40% w kuwecie 2 cm?<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><strong>Rozwi\u0105zanie<\/strong><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Mo\u017cna go r\u00f3wnie\u017c rozwi\u0105za\u0107 za pomoc\u0105 prawa Beera-Lamberta. W zwi\u0105zku z tym,<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">\\[- \\log(I_t) = &#8211; \\log(0.4) = 0,20 \\times c \\times 2\\]<\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\">Wtedy \\(c\\) = 0,9948<\/p>\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Bibliografia<\/h2>\n\n<ol class=\"wp-block-list\"><li>Atkinsa, Piotra i Julio de Paula. Chemia Fizyczna dla Nauk Przyrodniczych. Nowy Jork: Oxford University Press, 2006.<\/li><li>Chang, Rajmund. Chemia fizyczna dla nauk biologicznych. USA: Uniwersyteckie ksi\u0105\u017cki naukowe, 2005.<\/li><li>Gore, Michael. Spektrofotometria i spektrofluorymetria. Nowy Jork: Oxford University Press, 2000.<\/li><li>Cena, Miko\u0142aj i Dwek, Raymond i Wormald, Marek. Zasady i problemy w chemii fizycznej dla biochemik\u00f3w. RG Ratcliffe. Nowy Jork: Oxford University Press, 1997.<\/li><li>Irwin H. Segel, Obliczenia biochemiczne (Jak rozwi\u0105zywa\u0107 problemy matematyczne w og\u00f3lnej biochemii), wydanie 2, John Wiley &amp; Sons, 1975<\/li><li><a href=\"http:\/\/www.nist.gov\/pml\/div685\/grp03\/spectrophotometry.cfm\" target=\"_blank\" rel=\"noreferrer noopener\">http:\/\/www.nist.gov\/pml\/div685\/grp03\/spectrophotometry.cfm<\/a><\/li><\/ol>\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Wsp\u00f3\u0142tw\u00f3rcy i atrybucje<\/h2>\n\n<ul class=\"wp-block-list\"><li>Kevin Vo (UCD)<\/li><\/ul>\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><a href=\"https:\/\/chem.libretexts.org\/@go\/page\/1431\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">\u0179r\u00f3d\u0142o<\/a><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><\/p>\n\n<p class=\"wp-block-paragraph\"><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Spektrofotometria to metoda pomiaru stopnia poch\u0142aniania \u015bwiat\u0142a przez substancj\u0119 chemiczn\u0105 poprzez pomiar nat\u0119\u017cenia \u015bwiat\u0142a podczas przechodzenia wi\u0105zki \u015bwiat\u0142a przez roztw\u00f3r pr\u00f3bki. Podstawow\u0105 zasad\u0105 jest to, \u017ce ka\u017cdy zwi\u0105zek poch\u0142ania lub przepuszcza \u015bwiat\u0142o w okre\u015blonym zakresie d\u0142ugo\u015bci fal. Pomiar ten mo\u017cna r\u00f3wnie\u017c wykorzysta\u0107 do pomiaru ilo\u015bci znanej substancji chemicznej. Spektrofotometria jest jedn\u0105 z najbardziej u\u017cytecznych metod<\/p>\n<div class=\"klb-readmore entry-button\"><a class=\"button\" href=\"https:\/\/qvarz.com\/pl\/spektrofotometria\/\">Read More<\/a><\/div>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_uag_custom_page_level_css":"","ub_ctt_via":"","footnotes":""},"categories":[814,820],"tags":[],"class_list":["post-68072","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-spektrofotometria","category-wszystkie-posty"],"featured_image_src":null,"author_info":{"display_name":"admin","author_link":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/author\/admin\/"},"uagb_featured_image_src":{"full":false,"thumbnail":false,"medium":false,"medium_large":false,"large":false,"1536x1536":false,"2048x2048":false,"bacola-woo-product":false,"woocommerce_thumbnail":false,"woocommerce_single":false,"woocommerce_gallery_thumbnail":false,"variation_swatches_image_size":false,"variation_swatches_tooltip_size":false,"dgwt-wcas-product-suggestion":false},"uagb_author_info":{"display_name":"admin","author_link":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/author\/admin\/"},"uagb_comment_info":0,"uagb_excerpt":"Spektrofotometria to metoda pomiaru stopnia poch\u0142aniania \u015bwiat\u0142a przez substancj\u0119 chemiczn\u0105 poprzez pomiar nat\u0119\u017cenia \u015bwiat\u0142a podczas przechodzenia wi\u0105zki \u015bwiat\u0142a przez roztw\u00f3r pr\u00f3bki. Podstawow\u0105 zasad\u0105 jest to, \u017ce ka\u017cdy zwi\u0105zek poch\u0142ania lub przepuszcza \u015bwiat\u0142o w okre\u015blonym zakresie d\u0142ugo\u015bci fal. Pomiar ten mo\u017cna r\u00f3wnie\u017c wykorzysta\u0107 do pomiaru ilo\u015bci znanej substancji chemicznej. Spektrofotometria jest jedn\u0105 z najbardziej u\u017cytecznych metodRead&hellip;","_links":{"self":[{"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/68072","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=68072"}],"version-history":[{"count":3,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/68072\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":68142,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/68072\/revisions\/68142"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=68072"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=68072"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=68072"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}