{"id":69412,"date":"2022-02-21T15:43:15","date_gmt":"2022-02-21T07:43:15","guid":{"rendered":"https:\/\/qvarz.com\/wskazowki-i-porady-dotyczace-pomiarow-fotometrycznych\/"},"modified":"2022-02-21T15:43:52","modified_gmt":"2022-02-21T07:43:52","slug":"wskazowki-i-porady-dotyczace-pomiarow-fotometrycznych","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wskazowki-i-porady-dotyczace-pomiarow-fotometrycznych\/","title":{"rendered":"Wskaz\u00f3wki i porady dotycz\u0105ce pomiar\u00f3w fotometrycznych"},"content":{"rendered":"\n

Warto mie\u0107 na uwadze nie tylko sam proces pomiaru fotometrycznego, ale tak\u017ce jego konfiguracj\u0119, \u015brodowisko pomiarowe i u\u017cywany sprz\u0119t.<\/strong><\/p>\n\n

\u0179r\u00f3d\u0142o obrazu: marodon 333\/shutterstock.com<\/em><\/p>\n\n

Fotometria jest powszechn\u0105, \u0142atw\u0105 do wykonania metod\u0105 oznaczania st\u0119\u017ce\u0144 substancji w roztworze, a tak\u017ce umo\u017cliwia ocen\u0119 czysto\u015bci pr\u00f3bki. Jednak w przypadkach, gdy warto\u015bci nie maj\u0105 oczywistego sensu lub znacznie si\u0119 r\u00f3\u017cni\u0105, rozwi\u0105zywanie problem\u00f3w mo\u017ce by\u0107 skomplikowane. Dlatego pomocne jest wyeliminowanie mo\u017cliwych \u017ar\u00f3de\u0142 b\u0142\u0119d\u00f3w od samego pocz\u0105tku i zwr\u00f3cenie szczeg\u00f3lnej uwagi na nast\u0119puj\u0105ce kwestie podczas konfigurowania i wykonywania pomiar\u00f3w fotometrycznych. <\/p>\n\n

Konfiguracja i \u015brodowisko<\/strong><\/p>\n\n

Rozpuszczalnik <\/strong>Na absorbancj\u0119 pr\u00f3bki wp\u0142ywa jej pH i si\u0142a jonowa jej rozpuszczalnika [1]. Zalecane s\u0105 bufory o niskiej zawarto\u015bci soli i neutralnym lub lekko zasadowym pH, kt\u00f3re zapobiega wahaniom pH. Jednocze\u015bnie absorbancja w\u0142a\u015bciwa bufora przy mierzonej d\u0142ugo\u015bci fali powinna by\u0107 niska, aby unikn\u0105\u0107 ewentualnych ogranicze\u0144 zakresu pomiarowego. <\/p>\n\n

\"\"<\/a><\/figure><\/div>\n\n

Roztw\u00f3r<\/strong>W przypadku silnie st\u0119\u017conych roztwor\u00f3w pr\u00f3bek mo\u017ce by\u0107 konieczne rozcie\u0144czenie w celu utrzymania liniowego zakresu pomiaru. Idealne s\u0105 rozcie\u0144czenia w zakresie 1:10. Rozcie\u0144czenia wy\u017csze ni\u017c 1:50 nie s\u0105 zalecane ze wzgl\u0119du na rosn\u0105ce ryzyko niedok\u0142adno\u015bci wprowadzanych na tym etapie pipetowania. W zasadzie do dok\u0142adnego i precyzyjnego pipetowania nale\u017cy u\u017cywa\u0107 skalibrowanego systemu pipet i ko\u0144c\u00f3wek do pipet. <\/p>\n\n

\"\"<\/a><\/figure><\/div>\n\n

Mieszanie<\/strong>Po przygotowaniu rozcie\u0144cze\u0144, ale tak\u017ce po d\u0142ugich okresach bezruchu w pr\u00f3bce mog\u0105 wyst\u0105pi\u0107 lokalne r\u00f3\u017cnice st\u0119\u017ce\u0144. Dlatego wa\u017cne jest, aby dok\u0142adnie wymiesza\u0107 roztw\u00f3r pr\u00f3bki przed i po ka\u017cdym etapie rozcie\u0144czania, a tak\u017ce bezpo\u015brednio przed pomiarem. Najlepsze rezultaty osi\u0105ga si\u0119 poprzez worteksowanie.<\/p>\n\n

\"\"<\/a><\/figure><\/div>\n\n

Temperatura<\/strong>\u015arodowisko i fotometr, a tak\u017ce kuwety i pr\u00f3bki powinny by\u0107 utrzymywane w identycznych temperaturach, aby zapobiec dryfowi mierzonych warto\u015bci. <\/p>\n\n

\"\"<\/a><\/figure><\/div>\n\n

Sprz\u0119t i pomiary<\/strong><\/h4>\n\n

Kuwety<\/strong>Przy doborze kuwet jednym z najwa\u017cniejszych czynnik\u00f3w decyduj\u0105cych jest ich przezroczysto\u015b\u0107 przy wymaganych d\u0142ugo\u015bciach fal, a tak\u017ce kompatybilno\u015b\u0107 z odpowiednim fotometrem. Obejmuje to na przyk\u0142ad koordynacj\u0119 wysoko\u015bci \u015bcie\u017cek \u015bwiat\u0142a i zapewnienie, \u017ce kuwety s\u0105 wype\u0142nione wystarczaj\u0105c\u0105 obj\u0119to\u015bci\u0105 pr\u00f3bki. W celu uzyskania dok\u0142adnych wynik\u00f3w, zar\u00f3wno \u015blep\u0105 pr\u00f3b\u0119, jak i pr\u00f3bki, nale\u017cy mierzy\u0107 w tej samej kuwecie, przy czym kuweta zawsze znajduje si\u0119 w tej samej orientacji w trzonie kuwety.<\/p>\n\n

\"\"<\/a><\/figure><\/div>\n\n

Pomiar<\/strong>Przed pomiarem nale\u017cy zachowa\u0107 ostro\u017cno\u015b\u0107, aby unikn\u0105\u0107 tworzenia si\u0119 p\u0119cherzyk\u00f3w powietrza wewn\u0105trz kuwety, kt\u00f3re zak\u0142\u00f3ci\u0142yby drog\u0119 \u015bwiat\u0142a (dotyczy to zar\u00f3wno \u015blepej pr\u00f3by, jak i pr\u00f3bek). Ustawienia fotometru musz\u0105 by\u0107 odpowiednie dla wybranej metody, pr\u00f3bki i wybranych kuwet. Po pomiarze wszystkie wyniki nale\u017cy sprawdzi\u0107 pod k\u0105tem wiarygodno\u015bci.<\/p>\n\n

\"\"<\/a><\/figure><\/div>\n\n

Bibliografia:<\/strong><\/p>\n\n

[1] Wilfinger WW, Mackey K, Chomczy\u0144ski P. Wp\u0142yw pH i si\u0142y jonowej na spektrofotometryczn\u0105 ocen\u0119 czysto\u015bci kwasu nukleinowego. BioTechniki<\/em> 1997; 22:474\u2013481.<\/p>\n\n

\u0179r\u00f3d\u0142o<\/a><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

Warto mie\u0107 na uwadze nie tylko sam proces pomiaru fotometrycznego, ale tak\u017ce jego konfiguracj\u0119, \u015brodowisko pomiarowe i u\u017cywany sprz\u0119t. \u0179r\u00f3d\u0142o obrazu: marodon 333\/shutterstock.com Fotometria jest powszechn\u0105, \u0142atw\u0105 do wykonania metod\u0105 oznaczania st\u0119\u017ce\u0144 substancji w roztworze, a tak\u017ce umo\u017cliwia ocen\u0119 czysto\u015bci pr\u00f3bki. Jednak w przypadkach, gdy warto\u015bci nie maj\u0105 oczywistego sensu lub znacznie si\u0119 r\u00f3\u017cni\u0105, rozwi\u0105zywanie<\/p>\n

Read More<\/a><\/div>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"parent":0,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_uag_custom_page_level_css":"","ub_ctt_via":"","footnotes":""},"class_list":["post-69412","page","type-page","status-publish","hentry"],"featured_image_src":null,"uagb_featured_image_src":{"full":false,"thumbnail":false,"medium":false,"medium_large":false,"large":false,"1536x1536":false,"2048x2048":false,"bacola-woo-product":false,"woocommerce_thumbnail":false,"woocommerce_single":false,"woocommerce_gallery_thumbnail":false,"variation_swatches_image_size":false,"variation_swatches_tooltip_size":false,"dgwt-wcas-product-suggestion":false},"uagb_author_info":{"display_name":"admin","author_link":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/author\/admin\/"},"uagb_comment_info":0,"uagb_excerpt":"Warto mie\u0107 na uwadze nie tylko sam proces pomiaru fotometrycznego, ale tak\u017ce jego konfiguracj\u0119, \u015brodowisko pomiarowe i u\u017cywany sprz\u0119t. \u0179r\u00f3d\u0142o obrazu: marodon 333\/shutterstock.com Fotometria jest powszechn\u0105, \u0142atw\u0105 do wykonania metod\u0105 oznaczania st\u0119\u017ce\u0144 substancji w roztworze, a tak\u017ce umo\u017cliwia ocen\u0119 czysto\u015bci pr\u00f3bki. Jednak w przypadkach, gdy warto\u015bci nie maj\u0105 oczywistego sensu lub znacznie si\u0119 r\u00f3\u017cni\u0105, rozwi\u0105zywanieRead…","_links":{"self":[{"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/69412","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=69412"}],"version-history":[{"count":3,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/69412\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":69419,"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/69412\/revisions\/69419"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/qvarz.com\/pl\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=69412"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}