Chun críche anailísí fótaiméadracha ar shamplaí leachtacha, ní mór an réiteach a chur isteach i gcosán solais fótaiméadar i bhformáid shainithe. Is iad Cuvettes, ie coimeádáin samplacha a bhfuil fuinneoga optúla iontu, an rogha chaighdeánach don fheidhmchlár seo.

Foinse íomhá: science photo/shutterstock.com

Chun críche anailísí fótaiméadracha ar shamplaí leachtacha, ní mór an réiteach a chur isteach i gcosán solais fótaiméadar i bhformáid shainithe. Is iad Cuvettes, ie coimeádáin samplacha a bhfuil fuinneoga optúla iontu, an rogha chaighdeánach don fheidhmchlár seo. Tá an fad idir na fuinneoga optúla sainmhínithe go cruinn; ar an mbealach seo, tá fad cosán an tsampla taobh istigh den chuvette ar eolas. Tá roghnú na gcineálacha éagsúla cuvettes ollmhór – fiú mura meastar ach na cuvettes sin a úsáidtear le haghaidh tomhais ionsúcháin i réimse na speictreascópachta UV-Vis. Is é an cineál cuvette is coitianta ná cearnach, le toisí seachtracha 12.5 x 12.5 mm. Freastalaíonn an fhormáid seo ar thoirteanna samplacha ón raon micrilítear (cuvettes ultra-mhiocróbach) go dtí an raon millilítear (macra cuvettes) (figiúr 1). Is é 10 mm fad cosán caighdeánach cuvette; áfach, tá cuvettes a sholáthraíonn cosán solais níos giorra tríd an sampla ar fáil freisin. Ina theannta sin, tá difríocht idir cuvettes maidir lena n-ábhar, a n-airde agus méid a bhfuinneog tomhais (figiúr 1).

Fíor 1: Cuvettes a bhfuil na toisí caighdeánacha seachtracha acu de 12.5 x 12.5 mm ach a dteastaíonn íosmhéideanna samplacha éagsúla uathu.

Seiceáil ár liosta Cuvettes Grianchloch le haghaidh Speictreascópacht UV/Vis/IR

Beidh an cinneadh maidir le cén cineál cuvette a roghnú ag brath ar an ionstraim a úsáidtear, ar nádúr an iarratais agus ar airíonna an tsampla. Tá sé tábhachtach go ginearálta go mbeadh cuvettes chomh trédhearcach agus is féidir chun na tonnfhaid a thomhas ionas nach gcuirfear teorainn le raon líneach an fhótaiméadar atá ar fáil.

Éilíonn roghnú an trealaimh ceanglais ar an cuvette toisc go gcaithfidh sé a bheith ag luí leis an bhfeiste. Baineann sé seo go príomha le toisí seachtracha an cuvette, toisc go gcaithfidh sé a bheith oiriúnach isteach sa seafta cuvette, ach tá airde na bhfuinneoga tomhais ríthábhachtach freisin. Caithfidh siad seo a ailíniú go foirfe leis an gcosán solais a théann tríd an ionstraim. Tá an breithniú seo thar a bheith ábhartha maidir le cuvettes atá deartha chun toirteanna beaga a thomhas agus a bhfuil fuinneoga tomhais an-bheag acu mar sin. Is iad airde coitianta na gcosán solais 8.5 mm agus 15 mm.

Baineann an chéad ghné thábhachtach eile leis na tonnfhaid tomhais a bhaineann leis an iarratas atá ar láimh. Níl cuvettes caighdeánach déanta as PMMA, polaistiréin nó gloine gnáth ach trédhearcach sa raon infheicthe. Má úsáidtear tonnfhaid sa raon UV, faoi bhun thart ar 300 nm, ní mór cuvettes déanta as gloine Grianchloch, nó cineál speisialta plaisteach, a sholáthraíonn trédhearcacht leordhóthanach sa raon seo, a úsáid (figiúr 2).

Fíor 2: Difríochtaí idir speictream ionsúcháin cuvettes déanta as ábhair éagsúla, arna dtomhas idir 220 nm agus 400 nm

Tá sé ríthábhachtach sampla a théamh agus a rialú go héifeachtach le linn an phróisis tomhais do na modhanna sin a bhíonn ag brath ar imoibrithe a tharlaíonn ag teocht shonrach áirithe agus a thomhaiseann ionsú thar am. Chomh maith le leibhéal cuí friotaíochta an ábhair, tá sé tábhachtach sa chás seo go bhfuil an limistéar teagmhála idir balla an cuvette agus an seafta cuvette rialaithe teochta chomh mór agus is féidir. Ar na cúiseanna seo, cuireann cuvettes áirithe, mar shampla macra-cuvettes, buntáiste ar fáil in iarratais atá faoi rialú teochta.

I measc na ngnéithe eile a mbeidh tionchar acu ar rogha cuvette tá nádúr, toirt agus tiúchan an tsampla atá ar láimh.
Má tá an sampla bunaithe ar thuaslagán uiscí, tá an t-ábhar as a ndéantar an cuvette sách neamhleanúnach. Más rud é, ar an láimh eile, go bhfuil tuaslagóirí orgánacha i gceist, is iad cuvettes gloine an rogha is fearr mar go léiríonn siad seo friotaíocht níos airde i gcomparáid le malairtí déanta as plaisteach.

Mura bhfuil ach méid beag sampla ar fáil, d’fhéadfaí smaoineamh ar an sampla a athúsáid chun na tomhais seo a leanas a dhéanamh. Sa chás seo, moltar cuvettes plaisteacha aonúsáide. Má dhéantar cuvettes plaisteacha a phacáistiú ina n-aonar agus de ghrád íonachta cuí, laghdófar an baol éillithe. De rogha air sin, féadfar cuvettes a roghnú a dearadh chun freastal ar líon fíorbheag.

Beidh tionchar ag tiúchan an tsampla freisin ar an rogha cuvette toisc go bhfuil uasteorainn braite ag gach ionstraim. Mar shampla, má úsáidtear fótaiméadar le raon tomhais líneach suas le 2 A le fad cosáin 10 mm, is féidir DNA dhá shnáithe a chainníochtú go hiontaofa suas go dtí uastiúchan 100 µg/ml. Ní mór tuaslagáin de thiúchan níos airde a chaolú, nó is féidir an caolú a insamhladh le cuvette a bhfuil fad cosáin níos giorra aige. De réir dhlí Lambert-Beer, ceadaíonn fad cosáin 1 mm comhchruinnithe dsDNA chomh hard le 1,000 µg/mL a thomhas.

Mura bhfuil sé forordaithe ag nádúr an iarratais, cuireann ábhar an chuvette rogha eile le déanamh. Go ginearálta, léiríonn cuvettes gloine níos mó trédhearcachta agus cruinneas tomhais, agus is féidir iad a athúsáid go minic. Ansin arís, tá láimhseáil cuvettes plaisteach simplí agus sábháilte. Ós rud é nach n-úsáidtear cuvettes plaisteacha ach uair amháin agus nach dteastaíonn glanadh orthu, ní gá damáiste agus caillteanas féideartha a chur san áireamh.

Foinse