Πώς να ξεπεραστούν οι παρεμβολές στις UV – Ορατές Φασματοσκοπικές Μελέτες;
Στην ιδανική περίπτωση, το φάσμα απορρόφησης ενός διαλύματος που περιέχει μία μόνο αναλυόμενη ουσία θα πρέπει να είναι μία μονή ζώνη απορρόφησης στο μήκος κύματος της μέγιστης απορρόφησης. Ωστόσο, σε πραγματικά δείγματα το φάσμα επηρεάζεται από την παρουσία άλλων ειδών που παρεμβάλλονται. Τέτοιες παρεμβολές μπορούν εύκολα να εξαλειφθούν με την υιοθέτηση διαφορετικών προσεγγίσεων που καλύπτονται στο άρθρο.
Οι παρεμβολές στη φασματοσκοπία της ορατής υπεριώδους ακτινοβολίας προκύπτουν από διάφορους παράγοντες που μπορεί να είναι φυσικοί ή χημικοί. Οι χημικές παρεμβολές προκύπτουν από την παρουσία οποιασδήποτε μεμονωμένης ή ομάδας ενώσεων που απορροφούν σε κοντινή απόσταση από το πρωτεύον απορροφητικό μόριο. Από την άλλη πλευρά, οι φυσικές παρεμβολές προκύπτουν γενικά από αιωρούμενες στερεές ακαθαρσίες στο δείγμα οι οποίες μπορούν να οδηγήσουν σε σκέδαση.
Φυσικές παρεμβολές
Η σκέδαση του φωτός προκαλείται από την παρουσία αιωρούμενων ακαθαρσιών στο απορροφητικό διάλυμα. Έχει ως αποτέλεσμα μια απορρόφηση υποβάθρου που μειώνει την απορρόφηση της αναλυόμενης ουσίας που ενδιαφέρει. Το φιλτράρισμα ή η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν από την πραγματοποίηση μετρήσεων απορρόφησης φαίνεται να είναι η προφανής λύση, αλλά αυτή δεν είναι πρακτική προσέγγιση όταν είναι διαθέσιμα μόνο δείγματα μεγέθους μl. Η απώλεια απορρόφησης λόγω της σκέδασης μπορεί να μειωθεί μειώνοντας το διάκενο μεταξύ του δείγματος και του ανιχνευτή.
Χημικές παρεμβολές
Οι χημικές παρεμβολές μπορεί να προκύψουν από την παρουσία μιας ή μιας ομάδας απορροφητικών οντοτήτων στο διάλυμα που απορροφά το φως.
Μετρήσεις Ισοαπορρόφησης
Σε περίπτωση που υπάρχει μια παρεμβαλλόμενη ένωση με γνωστά χαρακτηριστικά απορρόφησης, τότε η παρεμβολή της με την κύρια αναλυόμενη ουσία μπορεί να εξαλειφθεί επιλέγοντας ένα μήκος κύματος όπου η παρεμβαλλόμενη ένωση παρουσιάζει κάποια απορρόφηση όπως συμβαίνει στο αναλυτικό μήκος κύματος. Με την αφαίρεση της απορρόφησης σε αυτό το μήκος κύματος από την απορρόφηση στο αναλυτικό μήκος κύματος η υπολειπόμενη απορρόφηση είναι η σωστή απορρόφηση της αναλυόμενης ουσίας. Αυτή η προσέγγιση είναι πρακτική εάν υπάρχει μόνο ένας μεμονωμένος παρεμβολέας και εάν το μέγιστο μήκος κύματος απορρόφησής του απέχει πολύ από το μήκος κύματος απορρόφησης της αναλυόμενης ουσίας.
Παρεμβολές πολλαπλών συστατικών
Η ανάλυση πολλαπλών συστατικών είναι εφαρμόσιμη όταν υπάρχουν περισσότεροι από ένας παρεμβολείς και υπάρχει σημαντική φασματική επικάλυψη με τα φάσματα της κύριας αναλυόμενης ουσίας. Η απορρόφηση της καθαρής παρεμβολής αφαιρείται από τη μετρούμενη απορρόφηση για να καταλήξουμε στην πραγματική απορρόφηση της αναλυόμενης ουσίας που ενδιαφέρει,
Διόρθωση τριών σημείων
Σε αυτή τη μέθοδο επιλέγονται δύο μήκη κύματος κοντά στο αναλυτικό μήκος κύματος αλλά και στις δύο πλευρές του. Η παρεμβολή του φόντου μπορεί να εκτιμηθεί με ακρίβεια χρησιμοποιώντας γραμμική παρεμβολή. Η μέθοδος είναι εφαρμόσιμη ιδιαίτερα για μη γραμμικές απορροφήσεις υποβάθρου που προκύπτουν από σύνθετους πίνακες δειγμάτων.
Φασματοσκοπία παραγώγων
Μακράν η πιο βολική προσέγγιση για τη διόρθωση του φόντου και του θορύβου είναι η φασματοσκοπία παραγώγων. Το σημείο κάμψης της πρώτης παραγώγου αντιστοιχεί στο μήκος κύματος της μέγιστης απορρόφησης και η δεύτερη παράγωγο εμφανίζεται ως η κορυφή της αρνητικής διαμορφωμένης κορυφής. Αυτό βοηθά στη διαφοροποίηση μεταξύ πολύ στενών ή επικαλυπτόμενων κορυφών απορρόφησης. Το πρώτο παράγωγο εξαλείφει περαιτέρω τις μετατοπίσεις της γραμμής βάσης, εάν υπάρχουν, και αυτό βοηθά στη βελτίωση της ακρίβειας της ποσοτικής ανάλυσης. Εκτός από τη μετατόπιση γραμμής βάσης, η φασματοσκοπία παραγώγων βοηθά επίσης να ξεπεραστούν τα αποτελέσματα της σκέδασης από άλλες μη αναγνωρισμένες παρεμβαλλόμενες ενώσεις.
Recent Comments